Перейти до вмісту
NCI-H3122
Тканина
Легені
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
NCI-H3122, H-3122, NCIH3122

Документи

NCI-H3122

Cell line · Номер товару 300484

The NCI-H3122 cell line is derived from non-small-cell lung cancer (NSCLC) and is characterized by the presence of the EML4-ALK fusion gene, which results...

€650.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія NCI-H3122 отримана з недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ) і характеризується наявністю гена злиття EML4-ALK, який є результатом хромосомної транслокації між мікротрубочками, асоційованими з протеїном 4 (EML4) і кіназою анапластичної лімфоми (ALK). Це злиття стимулює онкогенну сигналізацію і робить клітини NCI-H3122 дуже залежними від сигналізації ALK для виживання, відомими як "ALK-залежні" NCI-H3122 стала ключовою моделлю для вивчення таргетної терапії, зокрема, інгібіторів ALK, таких як кризотиніб.

Дослідження показали, що клітини NCI-H3122 чутливі до кризотинібу, який пригнічує фосфорилювання ALK та його наступні мішені, такі як AKT та ERK. Однак часто розвивається резистентність до кризотинібу, як правило, через альтернативні сигнальні шляхи, такі як активація рецептора епідермального фактора росту (EGFR). Цей механізм резистентності був підтверджений у резистентних варіантах NCI-H3122, де спостерігалося підвищене фосфорилювання EGFR, і було показано, що подвійне інгібування ALK і EGFR за допомогою кризотинібу та інгібіторів EGFR, таких як афатініб або ерлотиніб, дозволяє подолати резистентність.

NCI-H3122 часто використовується для дослідження комбінованої терапії, спрямованої на запобігання або подолання лікарської резистентності. Наприклад, таргетування шляхів ALK та EGFR виявилося успішною стратегією в доклінічних моделях, і таке подвійне інгібування було запропоновано як потенційний терапевтичний підхід для ALK-позитивних пацієнтів з НДКРЛ, резистентних до кризотинібу.

Тканина
Легені
Хвороба
Аденокарцинома
Синоніми
  • NCI-H3122
  • H-3122
  • NCIH3122

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Ідентифікатори

Посилання
NCI-H3122 (номер за каталогом Cytion 300484)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_5160

04Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

06Донор

Етнічна приналежність
Кавказець

Вам також може знадобитися