NCI-H3122

Az NCI-H3122 sejtvonal nem kissejtes tüdőrákból (NSCLC) származik, és az EML4-ALK fúziós gén jelenléte jellemzi, amely az echinoderm mikrotubulus-asszociált fehérje-szerű 4 (EML4) és az anaplasztikus limfóma kináz (ALK) közötti kromoszómatranszlokáció eredménye. Ez a fúzió az onkogén jelátvitelt irányítja, és az NCI-H3122 sejteket a túlélés érdekében nagymértékben függővé teszi az ALK jelátviteltől, úgynevezett "ALK-függővé" teszi Az NCI-H3122 a célzott terápiák, különösen az ALK-gátlók, például a krizotinib tanulmányozásának kulcsfontosságú modelljévé vált.

Vizsgálatok kimutatták, hogy az NCI-H3122 sejtek érzékenyek a krizotinibre, amely gátolja az ALK foszforilációt és annak downstream célpontjait, például az AKT és ERK útvonalakat. A crizotinibbal szembeni rezisztencia azonban gyakran kialakul, jellemzően alternatív jelátviteli útvonalak, például az epidermális növekedési faktor receptor (EGFR) aktiválása miatt. Ezt a rezisztencia-mechanizmust az NCI-H3122 rezisztens variánsok esetében megerősítették, ahol az EGFR fokozott foszforilációját figyelték meg, és az ALK és az EGFR kettős gátlása a krizotinib és az EGFR-gátlók, például az afatinib vagy az erlotinib alkalmazásával leküzdhetőnek bizonyult.

Az NCI-H3122-t gyakran használják a gyógyszerrezisztencia megelőzését vagy visszafordítását célzó kombinált terápiák feltárására. Például az ALK és az EGFR útvonalak megcélzása sikeres stratégiának bizonyult preklinikai modellekben, és ezt a kettős gátlást az ALK-pozitív, krizotinib-rezisztens NSCLC-s betegek potenciális terápiás megközelítésének javasolták.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban