NCI-H3122

A linha celular NCI-H3122 é derivada de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) e é caracterizada pela presença do gene de fusão EML4-ALK, que resulta de uma translocação cromossómica entre a proteína equinoderme microtubule-associated protein-like 4 (EML4) e a quinase do linfoma anaplásico (ALK). Esta fusão conduz a uma sinalização oncogénica e torna as células NCI-H3122 altamente dependentes da sinalização ALK para sobreviverem, sendo conhecidas como "ALK-addicted" A célula NCI-H3122 tornou-se um modelo chave para o estudo de terapias direcionadas, particularmente para inibidores da ALK como o crizotinib.

Estudos demonstraram que as células NCI-H3122 são sensíveis ao crizotinib, que inibe a fosforilação da ALK e os seus alvos a jusante, como as vias AKT e ERK. No entanto, a resistência ao crizotinib desenvolve-se frequentemente, normalmente devido a vias de sinalização alternativas, como a ativação do recetor do fator de crescimento epidérmico (EGFR). Este mecanismo de resistência foi confirmado nas variantes resistentes do NCI-H3122, em que se observou um aumento da fosforilação do EGFR, e a inibição dupla da ALK e do EGFR utilizando crizotinib e inibidores do EGFR, como o afatinib ou o erlotinib, demonstrou ultrapassar a resistência.

O NCI-H3122 é frequentemente utilizado para explorar terapias combinadas com o objetivo de prevenir ou inverter a resistência aos medicamentos. Por exemplo, o tratamento das vias ALK e EGFR tem sido uma estratégia bem sucedida em modelos pré-clínicos, e esta dupla inibição tem sido sugerida como uma potencial abordagem terapêutica para doentes com CPNPC ALK-positivo e resistente ao crizotinib.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia