NCI-H3122

NCI-H3122-cellelinjen stammer fra ikke-småcellet lungekreft (NSCLC) og kjennetegnes av tilstedeværelsen av fusjonsgenet EML4-ALK, som er resultatet av en kromosomal translokasjon mellom echinoderm mikrotubuli-assosiert protein-lignende 4 (EML4) og anaplastisk lymfomkinase (ALK). Denne fusjonen driver onkogen signalering og gjør NCI-H3122-celler svært avhengige av ALK-signalering for å overleve, kjent som "ALK-avhengige" NCI-H3122 har blitt en viktig modell for studier av målrettede behandlingsformer, særlig for ALK-hemmere som crizotinib.

Studier har vist at NCI-H3122-celler er følsomme for crizotinib, som hemmer ALK-fosforylering og dens nedstrøms mål som AKT- og ERK-veiene. Det utvikles imidlertid ofte resistens mot crizotinib, vanligvis på grunn av alternative signalveier som aktivering av den epidermale vekstfaktorreseptoren (EGFR). Denne resistensmekanismen er bekreftet i NCI-H3122-resistente varianter, der økt EGFR-fosforylering ble observert, og dobbel hemming av ALK og EGFR ved hjelp av crizotinib og EGFR-hemmere som afatinib eller erlotinib har vist seg å overvinne resistensen.

NCI-H3122 brukes ofte til å utforske kombinasjonsbehandlinger som tar sikte på å forebygge eller reversere legemiddelresistens. For eksempel har det vist seg å være en vellykket strategi i prekliniske modeller å angripe både ALK og EGFR, og denne doble hemmingen har blitt foreslått som en potensiell terapeutisk tilnærming for ALK-positive, crizotinib-resistente NSCLC-pasienter.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring