NCI-H3122

Dòng tế bào NCI-H3122 được phân lập từ ung thư phổi không phải tế bào nhỏ (NSCLC) và có đặc điểm là sự hiện diện của gen hợp nhất EML4-ALK, phát sinh từ sự chuyển đoạn nhiễm sắc thể giữa protein liên quan đến vi ống của động vật da gai 4 (EML4) và kinase lymphoma vô biệt hóa (ALK). Sự kết hợp này kích hoạt tín hiệu ung thư và khiến các tế bào NCI-H3122 phụ thuộc mạnh mẽ vào tín hiệu ALK để tồn tại, được gọi là "ALK-addicted". NCI-H3122 đã trở thành mô hình quan trọng để nghiên cứu các liệu pháp nhắm mục tiêu, đặc biệt là các chất ức chế ALK như crizotinib.

Các nghiên cứu đã chỉ ra rằng các tế bào NCI-H3122 nhạy cảm với crizotinib, chất ức chế phosphoryl hóa ALK và các mục tiêu hạ lưu của nó như các con đường AKT và ERK. Tuy nhiên, kháng thuốc đối với crizotinib thường phát triển, thường do các con đường tín hiệu thay thế như kích hoạt thụ thể yếu tố tăng trưởng biểu bì (EGFR). Cơ chế kháng thuốc này đã được xác nhận trong các biến thể kháng thuốc của NCI-H3122, nơi quan sát thấy sự phosphoryl hóa tăng cao của EGFR, và ức chế kép ALK và EGFR bằng crizotinib và các chất ức chế EGFR như afatinib hoặc erlotinib đã được chứng minh là có thể vượt qua kháng thuốc.

NCI-H3122 thường được sử dụng để nghiên cứu các liệu pháp kết hợp nhằm ngăn chặn hoặc đảo ngược kháng thuốc. Ví dụ, việc nhắm mục tiêu cả hai con đường ALK và EGFR đã là một chiến lược thành công trong các mô hình tiền lâm sàng, và ức chế kép này đã được đề xuất như một phương pháp điều trị tiềm năng cho bệnh nhân ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC) dương tính với ALK và kháng crizotinib.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.