NCI-H1299

NCI-H1299, còn được gọi là H1299, là một dòng tế bào ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC) ở người, được phân lập từ một khối di căn hạch bạch huyết của một bệnh nhân nam trưởng thành mắc ung thư phổi. Cùng với dòng tế bào H292, H1299 được sử dụng rộng rãi làm mô hình NSCLC trong nghiên cứu sinh học ung thư và miễn dịch ung thư. Dòng tế bào này có hình thái giống biểu mô, đặc trưng bởi các tế bào bám dính, dẹt với độ dày dưới 5 µm và thời gian nhân đôi xấp xỉ 22–30 giờ. Tế bào H1299 biểu hiện keratin và vimentin nhưng âm tính với protein ba sợi thần kinh, phản ánh một kiểu hình có cả đặc điểm biểu mô và trung mô.

Về mặt di truyền, tế bào H1299 mang đột biến xóa một phần đồng hợp tử trên gen TP53, dẫn đến mất hoàn toàn biểu hiện protein p53. Dòng tế bào này cũng được đặc trưng bởi trạng thái KRAS kiểu hoang dã, giúp phân biệt nó với các mô hình ung thư phổi không tế bào nhỏ (NSCLC) khác như tế bào A549, vốn mang đột biến KRAS nội sinh. Do sự vắng mặt của tín hiệu p53 chức năng kết hợp với KRAS nguyên vẹn, tế bào H1299 thường được sử dụng để nghiên cứu sinh học ức chế khối u, các con đường tín hiệu gây ung thư, apoptosis, di căn và cơ chế kháng trị liệu. So với các dòng tế bào NSCLC biểu mô hơn như A549, tế bào H1299 thể hiện kiểu hình trung mô hơn với biểu hiện dấu hiệu biểu mô giảm, khiến chúng đặc biệt hữu ích cho các nghiên cứu về quá trình chuyển đổi biểu mô-trung mô (EMT), xâm lấn và tiến triển di căn.

Các tế bào H1299 cũng được báo cáo là tổng hợp neuropeptide neuromedin B (NMB) ở mức độ thấp, trong khi không sản xuất được peptide giải phóng gastrin (GRP) có thể phát hiện được. Các đặc tính tăng trưởng mạnh mẽ, khả năng chuyển gen cao và nền tảng phân tử được đặc trưng rõ ràng của chúng đã góp phần vào việc sử dụng rộng rãi trong các nghiên cứu liên quan đến liệu pháp nhắm mục tiêu, chỉnh sửa gen, độc tính tế bào do miễn dịch và các con đường tín hiệu liên quan đến KRAS ở hạ lưu. Giống như tất cả các mô hình tế bào ung thư được nuôi cấy lâu dài, việc xác thực định kỳ và xác nhận các đặc điểm phân tử chính được khuyến nghị để đảm bảo tính tái hiện của thí nghiệm.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.