NCI-H1299

La lignée cellulaire NCI-H1299, également connue sous le nom de H1299, est une lignée cellulaire humaine de cancer du poumon à cellules non petites (CPNCP) établie à partir d’une métastase ganglionnaire provenant d’un patient adulte de sexe masculin atteint d’un carcinome pulmonaire. Tout comme les cellules H292, la lignée H1299 est largement utilisée comme modèle de CPNPC dans la recherche en biologie du cancer et en immuno-oncologie. Cette lignée cellulaire présente une morphologie de type épithélial caractérisée par des cellules adhérentes et aplaties d’une épaisseur inférieure à 5 µm, avec un temps de doublement d’environ 22 à 30 heures. Les cellules H1299 expriment la kératine et la vimentine, mais sont négatives pour la protéine triplet des neurofilaments, ce qui reflète un phénotype présentant à la fois des caractéristiques épithéliales et mésenchymateuses.

Sur le plan génétique, les cellules H1299 présentent une délétion partielle homozygote du gène TP53, entraînant une perte complète de l’expression de la protéine p53. Cette lignée se caractérise également par un statut KRAS de type sauvage, ce qui la distingue d’autres modèles de CPNPC tels que les cellules A549, qui portent des mutations endogènes du gène KRAS. En raison de l’absence de signalisation fonctionnelle de p53, combinée à un gène KRAS intact, les cellules H1299 sont fréquemment utilisées pour étudier la biologie des gènes suppresseurs de tumeurs, les voies de signalisation oncogéniques, l’apoptose, les métastases et les mécanismes de résistance aux traitements. Comparativement à des lignées cellulaires de CPNPC plus épithéliales telles que A549, les cellules H1299 présentent un phénotype plus mésenchymateux avec une expression réduite des marqueurs épithéliaux, ce qui les rend particulièrement utiles pour les recherches sur la transition épithélio-mésenchymateuse (TEM), l’invasion et la progression métastatique.

Il a également été rapporté que les cellules H1299 synthétisent le neuropeptide neuromédine B (NMB) à de faibles niveaux, tout en ne produisant pas de peptide libérateur de gastrine (GRP) détectable. Leurs caractéristiques de croissance robustes, leur haute transfectabilité et leur profil moléculaire bien caractérisé ont contribué à leur large utilisation dans des études portant sur les thérapies ciblées, l’édition génétique, la cytotoxicité à médiation immunitaire et les voies de signalisation en aval associées au gène KRAS. Comme pour tous les modèles de cellules tumorales cultivées à long terme, il est recommandé de procéder à une authentification périodique et à une confirmation des caractéristiques moléculaires clés afin d’assurer la reproductibilité des expériences.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.