NCI-H1299

NCI-H1299, известна също като H1299, е клетъчна линия на недребноклетъчен белодробен карцином (NSCLC) при човека, получена от метастаза в лимфен възел на възрастен мъж с белодробен карцином. Заедно с клетките H292, H1299 се използва широко като модел на NSCLC в изследванията в областта на раковата биология и имуноонкологията. Клетъчната линия проявява епителиоподобна морфология, характеризираща се с адхезивни, сплескани клетки с дебелина по-малко от 5 µm и приблизително време на удвояване от 22–30 часа. Клетките H1299 експресират кератин и виментини, но са отрицателни за неврофиламентен триплет протеин, което отразява фенотип с епителиални и мезенхимни характеристики.

Генетично, клетките H1299 притежават хомозиготна частична делеция в гена TP53, което води до пълна загуба на експресията на протеина p53. Линията се характеризира също така с див тип KRAS статус, което я отличава от други модели на NSCLC, като например клетките A549, които носят ендогенни KRAS мутации. Поради липсата на функционален p53 сигналинг в комбинация с интактен KRAS, клетките H1299 често се използват за изучаване на биологията на туморните супресори, онкогенните сигнални пътища, апоптозата, метастазите и механизмите на терапевтична резистентност. В сравнение с по-епителни клетъчни линии на NSCLC, като A549, клетките H1299 проявяват по-мезенхимен фенотип с намалена експресия на епителни маркери, което ги прави особено полезни за изследвания на епително-мезенхимния преход (EMT), инвазия и метастатично развитие.

Съобщава се също, че H1299 клетките синтезират невропептида невромедин B (NMB) в ниски нива, докато не се наблюдава производство на гастрин-освобождаващ пептид (GRP). Тяхната стабилна характеристика на растеж, висока трансфектируемост и добре охарактеризиран молекулен фон са допринесли за широкото им използване в проучвания, включващи целеви терапии, генетично редактиране, имуномедиирана цитотоксичност и надолу по веригата KRAS-асоциирани сигнални пътища. Както при всички модели на туморни клетки, култивирани в дългосрочен план, се препоръчва периодична автентификация и потвърждаване на ключовите молекулярни характеристики, за да се гарантира възпроизводимостта на експериментите.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация