Премини към съдържанието
Клетки A549
Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Карцином
Синоними
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Документи

Клетки A549

Cell line · Номер на продукта 300114

Клетките A549, получени от тъкан на белодробен аденокарцином, са основен модел, използван в изследванията на рака, особено в биомедицинските лаборатории, специализирани в областта на белодробните...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетките А549, получени от тъкан на белодробен аденокарцином, са основен модел, използван в изследванията на рака, особено в биомедицинските лаборатории, занимаващи се с ракови заболявания, свързани с белия дроб. Клетките A549 обикновено се използват като in vitro модел за изследване на биологията на рака на белия дроб, скрининг на лекарства и ефектите на токсични съединения.

В токсикологичните изследвания клетките A549 предлагат контролиран експериментален модел, който позволява на учените да изследват механизмите, лежащи в основата на токсичните ефекти и клетъчните реакции. Чрез разбирането на тези механизми изследователите могат по-добре да оценят безопасността на веществата и потенциално да смекчат вредните им ефекти.

Карциномните клетки A549 са широко използвани като in vitro модел за изследване на патогенезата на белодробния рак и като алтернативен модел за тъканни култури за различни изследвания, свързани с белодробните заболявания, в биомедицинските лаборатории. Тези клетки поддържат характеристиките на алвеоларни епителни клетки от тип II и се използват за изследване на епителните реакции към различни инфекции и възпалителни стимули, включително белодробно възпаление.

Освен това човешката клетъчна линия A549 служи като ценен инструмент за разработване на специфични антитела, насочени към протеини или маркери, свързани с рака на белия дроб. Като подлагат тези клетки на въздействието на интересуващи ги вещества, изследователите могат да проучат как те влияят върху клетъчната жизнеспособност, пролиферацията, апоптозата и други клетъчни процеси. Тази информация подпомага идентифицирането на потенциални терапевтични цели и разработването на нови методи за лечение на рак на белия дроб.

В обобщение, карциномните клетки А549 са от ключово значение за изследванията на рака, особено по отношение на рака, свързан с белия дроб, като служат като in vitro модел за изследвания на рака и токсикологията, разработване на ефективни лечения и скрининг на лекарства.

Тъкан
Бял дроб
Заболяване
Карцином
Синоними
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Кариотип
Клетките A549 имат модален брой хромозоми n2, като някои клетки имат 64 хромозоми.
Време за удвояване
28 часа

04Идентификатори

Източник
A549 (каталожен номер 300114 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0023

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
P53 положителен
Изоензими
G6PD, тип В
Обратна транскриптаза
Отрицателен

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L глюкоза, w: 2,5 mM L-глутамин, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM натриев пируват, w: 1,2 g/L NaHCO3 (номер на изделието на Cytion 820400a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
1 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
58 години
Етническа принадлежност
Кавказки