Gå direkte til indholdet
A549-celler
Væv
Lunge
Sygdom
Karcinom
Synonymer
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Dokumenter

A549-celler

Cell line · Varenummer 300114

A549-celler, der stammer fra væv fra lungeadenokarcinom, er en af de vigtigste modeller, der anvendes i kræftforskning, især i biomedicinske laboratorier med fokus på lunge...

€430.00ekskl. moms og fragt
På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
  • CoA
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

A549-celler, der stammer fra lungeadenokarcinomvæv, er en primær model, der bruges i kræftforskning, især i biomedicinske laboratorier, der fokuserer på lungerelaterede kræftformer. A549-celler bruges ofte som en in vitro-model til at studere lungekræftbiologi, screening af lægemidler og virkningerne af giftige stoffer.

I toksikologisk forskning er A549-celler en kontrolleret eksperimentel model, der gør det muligt for forskere at udforske de mekanismer, der ligger til grund for toksiske effekter og cellulære reaktioner. Ved at forstå disse mekanismer kan forskere bedre vurdere stoffers sikkerhed og potentielt afbøde deres skadelige virkninger.

A549-karcinomceller er i vid udstrækning blevet brugt som en in vitro-model til at studere lungekræftpatogenese og som en alternativ vævskulturmodel til forskellige lungerelaterede forskningsstudier i biomedicinske laboratorier. Disse celler har samme egenskaber som alveolære epitelceller af type II og bruges til at undersøge epitelets reaktion på forskellige infektioner og inflammatoriske stimuli, herunder lungebetændelse.

Desuden fungerer den humane cellelinje A549 som et værdifuldt værktøj i udviklingen af specifikke antistoffer rettet mod lungekræftrelaterede proteiner eller markører. Ved at udsætte disse celler for stoffer af interesse kan forskere undersøge, hvordan de påvirker cellernes levedygtighed, spredning, apoptose og andre cellulære processer. Denne information hjælper med at identificere potentielle terapeutiske mål og udvikle nye behandlinger for lungekræft.

Sammenfattende er A549-karcinomceller afgørende for kræftforskningen, især hvad angår lungerelaterede kræftformer, og de fungerer som en in vitro-model for kræft- og toksikologiforskning, udvikling af effektive behandlinger og screening af lægemidler.

Væv
Lunge
Sygdom
Karcinom
Synonymer
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Mand
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitel-lignende
Karyotype
A549-celler har det modale kromosomtal n2, med nogle celler med 64 kromosomer.
Fordoblingstid
28 timer

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A549 (Cytion katalognummer 300114)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Udtryk og modtagelighed

Proteinekspression
P53-positiv
Isoenzymer
G6PD, type B
Revers transkriptase
Negativ

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/L Glucose, w: 2,5 mM L-Glutamin, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM Sodium pyruvate, w: 1,2 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820400a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Såtæthed
1 x 104 celler/cm2
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Genopretning efter optøning
Efter optøning skal cellerne udplades med 5 x 104 celler/cm2, og cellerne skal have lov til at komme sig efter frysningsprocessen og hæfte sig fast i mindst 24 timer.
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
58 år
Etnisk tilhørsforhold
Kaukasisk