Gå direkte til indholdet
A549/DDP
Væv
Lunge

Dokumenter

A549/DDP

Cell line · Varenummer 305047

A549/DDP-cellelinjen er en lægemiddelresistent variant af A549-cellelinjen, som i sig selv er en model for humant alveolært basalt epitelialt adenokarcinom. Dette ...

€2,000.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

A549/DDP-cellelinjen er en lægemiddelresistent variant af A549-cellelinjen, som i sig selv er en model for humant alveolært basalepitel adenokarcinom. Denne variant er specifikt udvalgt for sin resistens over for cisplatin (DDP), et almindeligt kemoterapimiddel, der bruges til behandling af forskellige kræftformer, herunder lungekræft. Udviklingen af A549/DDP-cellelinjen gør det muligt for forskere at studere de mekanismer, der ligger til grund for kemoresistens, som er en stor udfordring i kræftbehandling.

I forskningen bruges A549/DDP-cellelinjen til at undersøge de biokemiske veje, der er involveret i cisplatinresistens. Dette omfatter udforskning af ændringer i genekspression, proteinfunktion og cellulær metabolisme, der giver resistens over for cisplatin. Cellelinjen er også værdifuld i screeningen af nye lægemidler eller lægemiddelkombinationer, der kan overvinde resistens, hvilket giver indsigt, der er afgørende for udviklingen af mere effektive terapeutiske strategier mod lungekræft.

Desuden bidrager undersøgelser med A549/DDP-cellelinjen til en bedre forståelse af det molekylære grundlag for lungekræftprogression og metastase i forbindelse med kemoresistens. Denne cellelinje fungerer som et vigtigt redskab for translationel forskning, der bygger bro mellem eksperimentelle resultater og potentielle kliniske anvendelser inden for onkologi.

Væv
Lunge

02Klassificering

Organisme
Menneske
Vækstegenskaber
Tilhænger
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A549/DDP (Cytion-katalognummer 305047)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Håndtering og opdræt

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.