Mine otse sisu juurde
A549/DDP
Kude
Kopsud

Dokumendid

A549/DDP

Cell line · Toote number 305047

Rakuliin A549/DDP on ravimresistentset tüüpi variant rakuliinist A549, mis on omakorda inimese alveolaarse basaalsete epiteelirakkude adenokartsinoomi mudel. See ...

€2,000.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Tellimusel valmistatud
1

01Üldine teave

Kirjeldus

A549/DDP rakuliin on A549 rakuliini ravimresistentne variant, mis omakorda on inimese alveolaarse basaalepiteeli adenokartsinoomi mudel. See variant on spetsiaalselt valitud resistentsuse tõttu tsisplatiini (DDP) suhtes, mis on levinud kemoteraapia ravim, mida kasutatakse erinevate vähivormide, sealhulgas kopsuvähi raviks. A549/DDP rakuliini väljatöötamine võimaldab teadlastel uurida kemoresistentsuse aluseks olevaid mehhanisme, mis on vähiravi üks peamisi probleeme.

Uuringutes kasutatakse A549/DDP rakuliini tsisplatiiniresistentsuse biokeemiliste radade uurimiseks. See hõlmab geeniekspressiooni, valkude funktsiooni ja raku metabolismi muutuste uurimist, mis annavad tsisplatiinile resistentsuse. Rakuliin on väärtuslik ka selliste uute ravimite või ravimikombinatsioonide sõelumisel, mis suudavad resistentsust ületada, andes nii ülevaateid, mis on olulised tõhusamate kopsuvähi vastaste ravistrateegiate väljatöötamiseks.

Lisaks sellele aitavad A549/DDP rakuliiniga tehtavad uuringud paremini mõista kopsuvähi progresseerumise ja metastaaside tekke molekulaarseid aluseid kemoresistentsuse kontekstis. See rakuliin on oluline vahend translatiivsete uuringute jaoks, mis võimaldab ühendada eksperimentaalseid tulemusi võimalike kliiniliste rakendustega onkoloogias.

Kude
Kopsud

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel

04Tunnused

Viide
A549/DDP (Cytioni katalooginumber 305047)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.