Перейти до вмісту
A549/DDP
Тканина
Легені

Документи

A549/DDP

Cell line · Номер товару 305047

Клітинна лінія A549/DDP є резистентним до ліків варіантом клітинної лінії A549, яка сама по собі є моделлю альвеолярної базально-епітеліальної аденокарциноми людини. Це ...

€2,000.00без урахування податків та вартості доставки
Виготовляється на замовлення
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія A549/DDP - це лікарсько-стійкий варіант клітинної лінії A549, яка сама по собі є моделлю альвеолярної базальної епітеліальної аденокарциноми людини. Цей варіант був спеціально відібраний через його стійкість до цисплатину (DDP), поширеного хіміотерапевтичного препарату, що використовується для лікування різних видів раку, в тому числі раку легенів. Створення клітинної лінії A549/DDP дозволяє дослідникам вивчати механізми, що лежать в основі хіміорезистентності, яка є основною проблемою в терапії раку.

У дослідженнях клітинна лінія A549/DDP використовується для вивчення біохімічних шляхів, що беруть участь у формуванні резистентності до цисплатину. Це включає вивчення змін в експресії генів, функції білків і клітинному метаболізмі, що зумовлюють стійкість до цисплатину. Клітинна лінія також є цінною для скринінгу нових препаратів або комбінацій препаратів, які можуть подолати резистентність, надаючи інформацію, що має вирішальне значення для розробки більш ефективних терапевтичних стратегій проти раку легенів.

Крім того, дослідження з використанням клітинної лінії A549/DDP сприяють кращому розумінню молекулярних основ прогресування і метастазування раку легенів в умовах хіміорезистентності. Ця клітинна лінія слугує важливим інструментом для трансляційних досліджень, з'єднуючи експериментальні результати з потенційними клінічними застосуваннями в онкології.

Тканина
Легені

02Класифікація

Організм
Людина
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальний

04Ідентифікатори

Посилання
A549/DDP (номер у каталозі Cytion 305047)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_C0W4

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
RPMI 1640, w: 2,0 мМ стабільний глютамін, w: 2,0 г/л NaHCO3 (номер за каталожним номером 820700a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.