Přejít na obsah
A549/DDP
Tkáň
Plíce

Dokumenty

A549/DDP

Cell line · Číslo výrobku 305047

Buněčná linie A549/DDP je varianta buněčné linie A549 odolná vůči léčivům, přičemž samotná linie A549 představuje model lidského adenokarcinomu bazálních epitelových buněk alveol. Tato ...

€2,000.00bez DPH a poštovného

Přizpůsobení / Doporučení

Na zakázku
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie A549/DDP je lékově rezistentní variantou buněčné linie A549, která je sama o sobě modelem lidského alveolárního bazálního epitelového adenokarcinomu. Tato varianta byla speciálně vybrána pro svou rezistenci vůči cisplatině (DDP), běžnému chemoterapeutiku používanému při léčbě různých druhů rakoviny, včetně rakoviny plic. Vývoj buněčné linie A549/DDP umožňuje vědcům studovat mechanismy, které stojí v pozadí chemorezistence, jež je velkým problémem při léčbě rakoviny.

Ve výzkumu se buněčná linie A549/DDP využívá ke zkoumání biochemických drah, které se podílejí na rezistenci vůči cisplatině. To zahrnuje zkoumání změn v genové expresi, funkci proteinů a buněčném metabolismu, které propůjčují rezistenci vůči cisplatině. Tato buněčná linie je také cenná při screeningu nových léčiv nebo kombinací léčiv, které mohou překonat rezistenci, a poskytuje poznatky, které jsou zásadní pro vývoj účinnějších léčebných strategií proti rakovině plic.

Studie využívající buněčnou linii A549/DDP navíc přispívají k lepšímu pochopení molekulární podstaty progrese a metastazování karcinomu plic v kontextu chemorezistence. Tato buněčná linie slouží jako zásadní nástroj pro translační výzkum, který propojuje experimentální poznatky s potenciálními klinickými aplikacemi v onkologii.

Tkáň
Plíce

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelové

04Identifikátory

Citace
A549/DDP (katalogové číslo Cytion 305047)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Manipulace a chov

Pěstovací médium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabilní glutamin, w: 2,0 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820700a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.