Siirry sisältöön
A549/DDP
Kudos
Keuhkot

Asiakirjat

A549/DDP

Cell line · Tuotenumero 305047

A549/DDP-solulinja on lääkeresistentti muunnos A549-solulinjasta, joka puolestaan on ihmisen alveolaarisen basaalisolujen adenokarsinooman malli. Tämä ...

€2,000.00ilman veroja ja toimituskuluja
Valmistetaan tilauksesta
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

A549/DDP-solulinja on lääkkeille vastustuskykyinen muunnos A549-solulinjasta, joka puolestaan on ihmisen alveolaarisen basaaliepiteelin adenokarsinooman malli. Tämä muunnos on valittu erityisesti sen vuoksi, että se on resistentti sisplatiinille (DDP), joka on yleinen kemoterapialääke, jota käytetään useiden syöpien, myös keuhkosyövän, hoidossa. A549/DDP-solulinjan kehittäminen antaa tutkijoille mahdollisuuden tutkia kemoresistenssin taustalla olevia mekanismeja, mikä on suuri haaste syövän hoidossa.

Tutkimuksessa A549/DDP-solulinjaa käytetään sisplatiiniresistenssiin liittyvien biokemiallisten reittien tutkimiseen. Tähän sisältyy sellaisten geeniekspression, proteiinien toiminnan ja soluaineenvaihdunnan muutosten tutkiminen, jotka aiheuttavat resistenssiä sisplatiinia vastaan. Solulinja on myös arvokas sellaisten uusien lääkkeiden tai lääkeyhdistelmien seulonnassa, joilla resistenssi voidaan voittaa, ja se tarjoaa tietoa, joka on ratkaisevan tärkeää tehokkaampien hoitostrategioiden kehittämiseksi keuhkosyöpää vastaan.

Lisäksi A549/DDP-solulinjalla tehdyt tutkimukset auttavat ymmärtämään paremmin keuhkosyövän etenemisen ja etäpesäkkeiden muodostumisen molekyyliperustaa kemoresistenssin yhteydessä. Tämä solulinja toimii kriittisenä välineenä translaatiotutkimuksessa, joka yhdistää kokeelliset havainnot mahdollisiin kliinisiin sovelluksiin onkologiassa.

Kudos
Keuhkot

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteeli

04Tunnisteet

Lähdeviite
A549/DDP (Cytion-tuotenumero 305047)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.