Gå til innholdet
A549/DDP
Vev
Lunge

Dokumenter

A549/DDP

Cell line · Produktnummer 305047

Cellelinjen A549/DDP er en medikamentresistent variant av cellelinjen A549, som i seg selv er en modell for humant alveolært basalt epitelialt adenokarsinom. Dette ...

€2,000.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

Lages på bestilling
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

A549/DDP-cellelinjen er en medikamentresistent variant av A549-cellelinjen, som i seg selv er en modell av humant alveolært basalt epitelial adenokarsinom. Denne varianten er spesielt selektert for sin resistens mot cisplatin (DDP), et vanlig cellegift som brukes i behandlingen av ulike kreftformer, inkludert lungekreft. Utviklingen av A549/DDP-cellelinjen gjør det mulig for forskere å studere mekanismene som ligger til grunn for kjemoresistens, noe som er en stor utfordring i kreftbehandling.

I forskningen brukes A549/DDP-cellelinjen til å undersøke de biokjemiske veiene som er involvert i cisplatinresistens. Dette omfatter utforskning av endringer i genuttrykk, proteinfunksjon og cellulær metabolisme som gir resistens mot cisplatin. Cellelinjen er også verdifull i screeningen av nye legemidler eller kombinasjoner av legemidler som kan overvinne resistens, noe som gir innsikt som er avgjørende for utviklingen av mer effektive behandlingsstrategier mot lungekreft.

Studier med A549/DDP-cellelinjen bidrar dessuten til en bedre forståelse av det molekylære grunnlaget for lungekreftprogresjon og metastasering i sammenheng med kjemoresistens. Denne cellelinjen er et viktig verktøy for translasjonsforskning, som bygger bro mellom eksperimentelle funn og potensielle kliniske anvendelser innen onkologi.

Vev
Lunge

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial

04Identifikatorer

Kildehenvisning
A549/DDP (Cytion-katalognummer 305047)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Håndtering og kultur

Næringsmedium
RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.