İçeriğe atla
A549/DDP
Doku
Akciğer

A549/DDP

Cell line · Ürün numarası 305047

A549/DDP hücre hattı, insan alveolar bazal epitelyal adenokarsinomun bir modeli olan A549 hücre hattının ilaca dirençli bir varyantıdır. Bu ...

€2,000.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Sipariş üzerine üretilir
1

01Genel bilgiler

Açıklama

A549/DDP hücre hattı, kendisi de bir insan alveolar bazal epitel adenokarsinom modeli olan A549 hücre hattının ilaca dirençli bir varyantıdır. Bu varyant, akciğer kanseri de dahil olmak üzere çeşitli kanserlerin tedavisinde kullanılan yaygın bir kemoterapi ilacı olan sisplatine (DDP) karşı direnci nedeniyle özel olarak seçilmiştir. A549/DDP hücre hattının geliştirilmesi, araştırmacıların kanser tedavisinde büyük bir zorluk olan kemorezistansın altında yatan mekanizmaları incelemelerine olanak sağlamaktadır.

Araştırmalarda A549/DDP hücre hattı, sisplatin direncinde rol oynayan biyokimyasal yolları araştırmak için kullanılmaktadır. Bu, sisplatine direnç kazandıran gen ekspresyonu, protein fonksiyonu ve hücresel metabolizmadaki değişikliklerin araştırılmasını içerir. Hücre hattı, direncin üstesinden gelebilecek yeni ilaçların veya ilaç kombinasyonlarının taranmasında da değerlidir ve akciğer kanserine karşı daha etkili terapötik stratejilerin geliştirilmesi için çok önemli bilgiler sağlar.

Ayrıca, A549/DDP hücre hattını kullanan çalışmalar, kemorezistans bağlamında akciğer kanseri ilerlemesi ve metastazının moleküler temelinin daha iyi anlaşılmasına katkıda bulunur. Bu hücre hattı, deneysel bulgular ile onkolojideki potansiyel klinik uygulamalar arasında köprü kurarak translasyonel araştırmalar için kritik bir araç görevi görmektedir.

Doku
Akciğer

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
A549/DDP (Cytion katalog numarası 305047)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.