Pāriet uz saturu
A549/DDP
Audums
Plaušas

Dokumenti

A549/DDP

Cell line · Preces numurs 305047

Šūnu līnija A549/DDP ir zāļu rezistentais variants šūnu līnijai A549, kas pati par sevi ir cilvēka alveolārā bazālā epitēlija adenokarcinomas modelis. Tas ...

€2,000.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Pēc pasūtījuma
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

A549/DDP šūnu līnija ir A549 šūnu līnijas, kas pati par sevi ir cilvēka alveolārās bazālās epitēlija adenokarcinomas modelis, zāļu rezistents variants. Šis variants ir īpaši atlasīts pēc tā rezistences pret cisplatīnu (DDP), kas ir izplatīts ķīmijterapijas līdzeklis, ko izmanto dažādu vēža veidu, tostarp plaušu vēža, ārstēšanā. A549/DDP šūnu līnijas izveide ļauj pētniekiem pētīt mehānismus, kas ir pamatā ķīmorezistencei, kas ir liela problēma vēža terapijā.

Pētījumos A549/DDP šūnu līniju izmanto, lai izpētītu bioķīmiskos ceļus, kas saistīti ar rezistenci pret cisplatīnu. Tas ietver gēnu ekspresijas, olbaltumvielu funkcijas un šūnu metabolisma izmaiņu izpēti, kas rada rezistenci pret cisplatīnu. Šūnu līnija ir vērtīga arī jaunu zāļu vai zāļu kombināciju, kas var pārvarēt rezistenci, skrīningā, sniedzot atziņas, kas ir ļoti svarīgas, lai izstrādātu efektīvākas terapeitiskās stratēģijas plaušu vēža ārstēšanai.

Turklāt pētījumi, kuros izmantota A549/DDP šūnu līnija, palīdz labāk izprast plaušu vēža progresēšanas un metastāžu veidošanās molekulāro pamatu saistībā ar ķīmorezistenci. Šī šūnu līnija kalpo kā būtisks instruments translatoloģisko pētījumu veikšanai, kas savieno eksperimentālos atklājumus ar iespējamiem klīniskiem lietojumiem onkoloģijā.

Audums
Plaušas

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija

04Identifikatori

Atsauce
A549/DDP (Cytion kataloga numurs 305047)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.