Skip to content
A549/DDP
Tissue
ปอด

Documents

A549/DDP

Cell line · Product number 305047

The A549/DDP cell line is a drug-resistant variant of the A549 cell line, which itself is a model of human alveolar basal epithelial adenocarcinoma. This ...

€2,000.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

Made to order
1

01General information

Description

สายเซลล์ A549/DDP เป็นสายพันธุ์ที่ดื้อยาของสายเซลล์ A549 ซึ่งเป็นแบบจำลองของมะเร็งอะดีโนคาร์ซิโนมาของเยื่อบุผิวฐานในปอดของมนุษย์ สายพันธุ์นี้ถูกคัดเลือกเป็นพิเศษเพื่อความต้านทานต่อยาซิสพลาติน (DDP) ซึ่งเป็นยาเคมีบำบัดที่ใช้กันอย่างแพร่หลายในการรักษามะเร็งหลายชนิด รวมถึงมะเร็งปอดการพัฒนาสายพันธุ์เซลล์ A549/DDP ช่วยให้ผู้วิจัยสามารถศึกษาถึงกลไกที่อยู่เบื้องหลังการดื้อยาเคมีบำบัด ซึ่งเป็นความท้าทายสำคัญในการรักษามะเร็ง

ในการวิจัย สายเซลล์ A549/DDP ถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาวิถีทางชีวเคมีที่เกี่ยวข้องกับการดื้อยาซิสพลาติน ซึ่งรวมถึงการศึกษาการเปลี่ยนแปลงของการแสดงออกของยีน การทำงานของโปรตีน และกระบวนการเมตาบอลิซึมของเซลล์ที่ก่อให้เกิดการดื้อยาซิสพลาติน สายเซลล์นี้ยังมีคุณค่าในการคัดกรองยาใหม่หรือการผสมผสานยาที่สามารถเอาชนะการดื้อยาได้ ซึ่งให้ข้อมูลเชิงลึกที่มีความสำคัญต่อการพัฒนาวิธีการรักษาที่มีประสิทธิภาพมากขึ้นสำหรับโรคมะเร็งปอด

นอกจากนี้ การศึกษาที่ใช้เซลล์ไลน์ A549/DDP ยังช่วยเพิ่มความเข้าใจเกี่ยวกับพื้นฐานทางโมเลกุลของการลุกลามของมะเร็งปอดและการแพร่กระจายในบริบทของการดื้อยาเคมีบำบัด เซลล์ไลน์นี้ทำหน้าที่เป็นเครื่องมือสำคัญสำหรับการวิจัยเชิงแปล ซึ่งเชื่อมโยงผลการทดลองกับการประยุกต์ใช้ทางคลินิกที่เป็นไปได้ในโรคมะเร็ง

Tissue
ปอด

02Classification

Organism
Human
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
เยื่อบุผิว

04Identifiers

Citation
A549/DDP (หมายเลขในแคตตาล็อก Cytion 305047)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_C0W4

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, w: 2.0 mM กลูตามีนเสถียร, w: 2.0 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า