Skip to content
เซลล์ A549
Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Synonyms
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Documents

เซลล์ A549

Cell line · Product number 300114

A549 cells, derived from lung adenocarcinoma tissue, are a primary model used in cancer research, particularly in biomedical laboratories focusing on lung...

€430.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

เซลล์ A549 ซึ่งได้มาจากเนื้อเยื่อมะเร็งปอดชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา เป็นแบบจำลองหลักที่ใช้ในงานวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะในห้องปฏิบัติการชีวการแพทย์ที่มุ่งเน้นมะเร็งที่เกี่ยวข้องกับปอด เซลล์ A549 มักถูกใช้เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองเพื่อศึกษาชีววิทยาของมะเร็งปอด การคัดกรองยา และผลกระทบของสารพิษต่าง ๆ

ในการวิจัยด้านพิษวิทยา เซลล์ A549 เป็นแบบจำลองการทดลองที่ควบคุมได้ ซึ่งช่วยให้นักวิทยาศาสตร์สามารถศึกษาถึงกลไกที่อยู่เบื้องหลังผลกระทบที่เป็นพิษและการตอบสนองของเซลล์ได้ ด้วยการทำความเข้าใจกลไกเหล่านี้ นักวิจัยจะสามารถประเมินความปลอดภัยของสารต่างๆ ได้ดีขึ้น และอาจลดผลกระทบที่เป็นอันตรายของสารเหล่านั้นได้

เซลล์มะเร็ง A549 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองในหลอดทดลองเพื่อศึกษาพยาธิกำเนิดของมะเร็งปอด และเป็นแบบจำลองเพาะเลี้ยงเนื้อเยื่อทางเลือกสำหรับการวิจัยที่เกี่ยวข้องกับปอดในหลากหลายด้านในห้องปฏิบัติการชีวการแพทย์ เซลล์เหล่านี้ยังคงลักษณะของเซลล์เยื่อบุผิวถุงลมชนิดที่สอง (type II alveolar epithelial cells) และถูกนำมาใช้เพื่อศึกษาการตอบสนองของเยื่อบุผิวต่อการติดเชื้อและสิ่งกระตุ้นการอักเสบต่างๆ รวมถึงการอักเสบของปอด

นอกจากนี้ สายเซลล์มนุษย์ A549 ยังเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการพัฒนาแอนติบอดีเฉพาะที่มุ่งเป้าไปยังโปรตีนหรือตัวบ่งชี้ที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งปอด โดยการนำเซลล์เหล่านี้ไปสัมผัสกับสารที่น่าสนใจ นักวิจัยสามารถศึกษาว่าสารเหล่านั้นส่งผลต่อความมีชีวิตของเซลล์ การเพิ่มจำนวน การตายของเซลล์แบบอะพอพโทซิส และกระบวนการเซลล์อื่นๆ อย่างไร ข้อมูลนี้ช่วยในการระบุเป้าหมายการรักษาที่เป็นไปได้และการพัฒนาวิธีการรักษาแบบใหม่สำหรับมะเร็งปอด

โดยสรุป เซลล์มะเร็ง A549 มีความสำคัญอย่างยิ่งในการวิจัยมะเร็ง โดยเฉพาะอย่างยิ่งที่เกี่ยวข้องกับมะเร็งปอด ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองในหลอดทดลองสำหรับการวิจัยด้านมะเร็งและพิษวิทยา การพัฒนาการรักษาที่มีประสิทธิภาพ และการคัดกรองยา

Tissue
ปอด
Disease
มะเร็งชนิดคาร์ซินอมา
Synonyms
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ลักษณะคล้ายเยื่อบุผิว
Karyotype
เซลล์ A549 มีจำนวนโครโมโซมที่เป็นค่าโมดอล n2 โดยมีบางเซลล์ที่มีโครโมโซม 64 ตัว
Doubling time
28 ชั่วโมง

04Identifiers

Citation
A549 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 300114)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 เป็นบวก
Isoenzymes
จี6พีดี, ประเภทบี
Reverse transcriptase
เชิงลบ

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3.1 กรัม/ลิตร กลูโคส, w: 2.5 มิลลิโมลาร์ L-กลูตามีน, w: 15 มิลลิโมลาร์ HEPES, w: 0.5 มิลลิโมลาร์ โซเดียมไพรูเวต, w: 1.2 กรัม/ลิตร NaHCO3 (หมายเลขบทความ Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Seeding density
1 x 10^4 เซลล์/ซม.^2
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Post-thaw recovery
หลังจากละลายน้ำแข็งแล้ว ให้เพาะเซลล์ในจานเพาะเลี้ยงที่ความหนาแน่น 5 x 104 เซลล์ต่อตารางเซนติเมตร และปล่อยให้เซลล์ฟื้นตัวจากกระบวนการแช่แข็งและยึดเกาะกับพื้นผิวเป็นเวลาอย่างน้อย 24 ชั่วโมง
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

08Donor

Donor age
58 ปี
Ethnicity
คอเคเชียน