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Células A549
Tissue
Pulmão
Disease
Carcinoma
Synonyms
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

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Células A549

Cell line · Product number 300114

A549 cells, derived from lung adenocarcinoma tissue, are a primary model used in cancer research, particularly in biomedical laboratories focusing on lung...

US$430.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

As células A549, derivadas de tecido de adenocarcinoma de pulmão, são um modelo primário utilizado na pesquisa sobre o câncer, particularmente em laboratórios biomédicos especializados em cânceres relacionados ao pulmão. As células A549 são comumente utilizadas como modelo in vitro para o estudo da biologia do câncer de pulmão, triagem de medicamentos e efeitos de compostos tóxicos.

Na pesquisa toxicológica, as células A549 oferecem um modelo experimental controlado que permite aos cientistas explorar os mecanismos subjacentes aos efeitos tóxicos e às respostas celulares. Ao compreender esses mecanismos, os pesquisadores podem avaliar melhor a segurança das substâncias e, potencialmente, mitigar seus efeitos nocivos.

As células de carcinoma A549 têm sido amplamente utilizadas como modelo in vitro para estudar a patogênese do câncer de pulmão e como modelo alternativo de cultura de tecidos para diversos estudos de pesquisa relacionados aos pulmões em laboratórios biomédicos. Essas células mantêm as características das células epiteliais alveolares do tipo II e são utilizadas para examinar as respostas epiteliais a diversas infecções e estímulos inflamatórios, incluindo a inflamação pulmonar.

Além disso, a linhagem celular humana A549 serve como uma ferramenta valiosa no desenvolvimento de anticorpos específicos direcionados a proteínas ou marcadores relacionados ao câncer de pulmão. Ao expor essas células a substâncias de interesse, os pesquisadores podem investigar como elas afetam a viabilidade celular, a proliferação, a apoptose e outros processos celulares. Essas informações auxiliam na identificação de alvos terapêuticos potenciais e no desenvolvimento de novos tratamentos para o câncer de pulmão.

Em resumo, as células carcinomatosas A549 são fundamentais na pesquisa sobre o câncer, especialmente no que diz respeito aos cânceres relacionados aos pulmões, servindo como um modelo in vitro para pesquisas sobre câncer e toxicologia, desenvolvimento de tratamentos eficazes e triagem de medicamentos.

Tissue
Pulmão
Disease
Carcinoma
Synonyms
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
De tipo epitelial
Karyotype
As células A549 apresentam o número modal de cromossomos n2, sendo que algumas células possuem 64 cromossomos.
Doubling time
28 horas

04Identifiers

Citation
A549 (número de catálogo da Cytion 300114)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Expression and susceptibility

Protein expression
P53 positivo
Isoenzymes
G6PD, tipo B
Reverse transcriptase
Negativo

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12 (1:1), p/v: 3,1 g/L de glicose, p/v: 2,5 mM de L-glutamina, p/v: 15 mM de HEPES, peso: 0,5 mM de piruvato de sódio, peso: 1,2 g/L de NaHCO₃ (número de artigo da Cytion 820400a)
Incubation atmosphere

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

Supplements
Adicione 10% de FBS ao meio
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Remova o meio antigo das células aderentes e lave-as com PBS sem cálcio nem magnésio. Para frascos T25, use 3 a 5 ml de PBS; para frascos T75, use 5 a 10 ml. Em seguida, cubra as células completamente com Accutase, utilizando 1 a 2 ml para frascos T25 e 2,5 ml para frascos T75. Deixe as células incubarem à temperatura ambiente por 8 a 10 minutos para que se desprendam. Após a incubação, misture delicadamente as células com 10 ml de meio para ressuspender, depois centrifugue a 300xg por 3 minutos. Descarte o sobrenadante, ressuspenda as células em meio fresco e transfira-as para novos frascos que já contenham meio fresco.
Seeding density
1 x 104 células/cm²
Fluid renewal
2 a 3 vezes por semana
Post-thaw recovery
Após o descongelamento, semeie as células a uma densidade de 5 x 10⁴ células/cm² e deixe que elas se recuperem do processo de congelamento e se adiram por pelo menos 24 horas.
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

A contaminação por micoplasma é descartada por meio de ensaios baseados em PCR e de métodos de detecção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não haja contaminação por bactérias, fungos ou leveduras, as culturas celulares são submetidas a inspeções visuais diárias.

Freeze medium
Como meio de criopreservação, utilizamos meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% de DMSO para garantir viabilidade adequada após o descongelamento, ou CM-1 (número de catálogo da Cytion 800100), que inclui osmoprotetores e estabilizadores metabólicos otimizados para melhorar a recuperação e reduzir o estresse induzido pela criopreservação.
Storage conditions

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

Shipping conditions

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

08Donor

Donor age
58 anos
Ethnicity
caucasiano