الانتقال إلى المحتوى
خلايا A549
الأنسجة
الرئة
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

المستندات

خلايا A549

Cell line · رقم المنتج 300114

تُعد خلايا A549، المستمدة من نسيج سرطان الغدة الرئوية، نموذجًا أساسيًا يُستخدم في أبحاث السرطان، لا سيما في المختبرات الطبية الحيوية التي تركز على الرئة...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

تُعد خلايا A549، المشتقة من أنسجة سرطان الرئة الغدي، نموذجًا أساسيًا يُستخدم في أبحاث السرطان، خاصة في المختبرات الطبية الحيوية التي تركز على السرطانات المرتبطة بالرئة. تُستخدم خلايا A549 بشكل شائع كنموذج مختبري لدراسة بيولوجيا سرطان الرئة وفحص الأدوية وتأثيرات المركبات السامة.

في أبحاث علم السموم، توفر خلايا A549 نموذجًا تجريبيًا مضبوطًا يمكّن العلماء من استكشاف الآليات الكامنة وراء التأثيرات السامة والاستجابات الخلوية. ومن خلال فهم هذه الآليات، يمكن للباحثين تقييم سلامة المواد بشكل أفضل، وربما التخفيف من آثارها الضارة.

استُخدمت الخلايا السرطانية A549 على نطاق واسع كنموذج مختبري لدراسة التسبب في سرطان الرئة وكنموذج بديل لزراعة الأنسجة في مختلف الدراسات البحثية المتعلقة بالرئة في المختبرات الطبية الحيوية. تحافظ هذه الخلايا على خصائص الخلايا الظهارية السنخية من النوع الثاني وتستخدم لفحص الاستجابات الظهارية لمختلف أنواع العدوى والمحفزات الالتهابية، بما في ذلك التهاب الرئة.

وعلاوة على ذلك، يُستخدم خط الخلايا البشرية A549 كأداة قيّمة في تطوير أجسام مضادة محددة تستهدف البروتينات أو العلامات المرتبطة بسرطان الرئة. ومن خلال تعريض هذه الخلايا لمواد ذات أهمية، يمكن للباحثين دراسة كيفية تأثيرها على قابلية الخلايا للحياة والتكاثر وموت الخلايا المبرمج وغيرها من العمليات الخلوية. تساعد هذه المعلومات في تحديد الأهداف العلاجية المحتملة وتطوير علاجات جديدة لسرطان الرئة.

باختصار، تُعد خلايا سرطان A549 السرطانية محورية في أبحاث السرطان، خاصة فيما يتعلق بالسرطانات المرتبطة بالرئة، حيث تُستخدم كنموذج مختبري لأبحاث السرطان وعلم السموم وتطوير علاجات فعالة وفحص الأدوية.

الأنسجة
الرئة
المرض
الورم السرطاني
المرادفات
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة
النمط الكروموسومي
تحتوي خلايا A549 على رقم كروموسوم نموذجي n2، مع وجود بعض الخلايا التي تحتوي على 64 كروموسومًا.
زمن المضاعفة
28 ساعة

04المعرّفات

المرجع
A549 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 300114)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0023

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير البروتيني
P53 إيجابي
الإيزوزيمات
G6PD، النوع B
إنزيم النسخ العكسي
سلبي

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
1 × 104 خلية/سم2
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
58 سنة
الأصل العرقي
قوقازي