A549-RFP

A549-RFP هو مشتق مُعلَّم بالفلورة من سلالة الخلايا البشرية A549 لسرطان الغدة الرئوي، وقد تم هندسته ليُعبِّر بشكل دائم عن البروتين الفلوري الأحمر (RFP) من أجل الترصد والتتبع في الوقت الفعلي. تم إنشاء السلالة الأصلية A549 من سرطان غدي رئوي مستمد من متبرع بالغ، وتُظهر هذه السلالة مورفولوجية ظهارية مع خصائص نمو ملتصقة. تحتفظ خلايا A549 بسمات الخلايا الظهارية السنخية من النوع الثاني، بما في ذلك التعبير عن السيتوكيراتينات والقدرة على إنتاج البروتين المرتبط بالسطح النشط. يتيح إدخال كاسيت تعبير RFP مستقر إضاءة فلورية مستمرة دون إحداث تغيير كبير في الخصائص التكاثرية والتمثيلية الذاتية للسلالة الأصلية، مما يجعل A549-RFP مناسبة لدراسات التصوير الطولية.

أظهرت التوصيف الوظيفي لخلايا A549 ضمن مجموعات كبيرة من الخلايا السرطانية أن حجم الخلية ومحتوى البروتين ومعدل تخليق البروتين ترتبط ارتباطًا إيجابيًا بحجم الخلية، وأن الخلايا الأكبر حجمًا تميل إلى التكاثر ببطء أكبر. في التحليلات المقارنة، تُصنف خلايا A549 ضمن سلالات الخلايا السرطانية الظهارية الأصغر نسبيًا والأسرع تكاثرًا، على عكس الخلايا الأكبر حجمًا والأكثر شبهاً بالخلايا الوسيطة التي تُظهر تعبيرًا أعلى عن فيمنتين ومستويات أقل من E-كادهيرين. تعد هذه الفروق الأيضية والظاهرية ذات صلة بالتفسير التجريبي، حيث تتناسب معدلات تخليق البروتين والتدفقات الأيضية مع حجم الخلية وتؤثر على الحساسية تجاه العوامل التي تستهدف التكاثر أو مسارات الابتنائية التي ينظمها mTOR. يحافظ تعديل RFP على ملاءمة خلايا A549 لمثل هذه الأبحاث الأيضية والدوائية مع تمكين الرؤية المباشرة.

يُستخدم A549-RFP على نطاق واسع في أنظمة الزراعة المشتركة، ونماذج الزرع الغريب في الموقع الطبيعي والخارجي، واختبارات الغزو أو الانتشار حيث يسهل التوسيم الفلوري التمييز بين الخلايا السرطانية ومكونات النسيج الضام أو المضيف. يدعم الفلورسنت الأحمر المستقر تطبيقات تشمل تصوير الخلايا الحية، والفحص عالي المحتوى، والتحديد الكمي القائم على قياس التدفق الخلوي، والتصوير البصري داخل الجسم الحي. باعتبارها متغيرًا قابلًا للتتبع لنموذج سرطان غدي رئوي موصوف جيدًا، توفر A549-RFP منصة قوية لدراسة تكاثر الخلايا السرطانية، والانتقال الظهاري-الوسطي، والاستجابة للأدوية، والتفاعلات بين الورم والبيئة المحيطة به في كل من البيئات المختبرية والحيوية.

التعديل الجيني: تم تعديله بشكل مستقر عن طريق نقل فيروسي لينتي غير قادر على التكاثر للتعبير عن بروتين فلوري أحمر (RFP) كمؤشر؛ ويتم الحفاظ عليه كمجموعة متعددة النسائل تحت انتقاء البوروميسين (1–5 ميكروغرام/مل). احتواء S1/BSL-1.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان