A549-RFP

A549-RFP เป็นสายเซลล์มะเร็งต่อมน้ำเหลืองในปอด A549 ของมนุษย์ที่ได้รับการติดฉลากด้วยสารเรืองแสง ซึ่งได้รับการดัดแปลงให้แสดงโปรตีนเรืองแสงสีแดง (RFP) อย่างต่อเนื่อง เพื่อการสังเกตและติดตามแบบเรียลไทม์ สายเซลล์ A549 ต้นแบบถูกสร้างขึ้นจากมะเร็งต่อมน้ำเหลืองปอดที่มาจากผู้บริจาคผู้ใหญ่ และแสดงลักษณะทางสัณฐานวิทยาของเซลล์เยื่อบุผิวพร้อมคุณสมบัติการเจริญเติบโตแบบยึดติด เซลล์ A549 ยังคงรักษาลักษณะของเซลล์เยื่อบุผิวถุงลมประเภท II ไว้ รวมถึงการแสดงออกของไซโตเคราตินและความสามารถในการผลิตโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับสารลดแรงตึงผิว การนำชุดยีนแสดง RFP แบบคงที่มาใช้ ทำให้เกิดการเรืองแสงอย่างต่อเนื่องโดยไม่เปลี่ยนแปลงคุณสมบัติการเพิ่มจำนวนและเมแทบอลิซึมโดยธรรมชาติของสายพันธุ์ต้นแบบอย่างมีนัยสำคัญ ทำให้ A549-RFP เหมาะสำหรับการศึกษาภาพแบบติดตามระยะยาว

การวิเคราะห์ลักษณะการทำงานของเซลล์ A549 ในกลุ่มเซลล์มะเร็งขนาดใหญ่ได้แสดงให้เห็นว่า ขนาดเซลล์ ปริมาณโปรตีน และอัตราการสังเคราะห์โปรตีน มีความสัมพันธ์เชิงบวกกับปริมาตรเซลล์ และเซลล์ที่มีขนาดใหญ่กว่ามักมีการเพิ่มจำนวนที่ช้ากว่า ในการวิเคราะห์เปรียบเทียบ เซลล์ A549 จัดอยู่ในกลุ่มสายพันธุ์เซลล์มะเร็งเยื่อบุที่มีขนาดเล็กกว่าและเพิ่มจำนวนได้เร็วกว่า เมื่อเทียบกับเซลล์ที่มีขนาดใหญ่กว่าและมีลักษณะคล้ายเซลล์เมเซนไคม์ ซึ่งแสดงการแสดงออกของวิเมนตินที่สูงขึ้นและระดับ E-cadherin ที่ต่ำลง ความแตกต่างทางเมแทบอลิซึมและฟีโนไทป์เหล่านี้มีความสำคัญต่อการตีความผลการทดลอง เนื่องจากอัตราการสังเคราะห์โปรตีนและกระแสเมแทบอลิซึมจะปรับตามขนาดเซลล์ และส่งผลต่อความไวต่อสารที่มุ่งเป้าไปที่การเพิ่มจำนวนเซลล์หรือเส้นทางอนาโบลิกที่ควบคุมโดย mTOR การดัดแปลงด้วย RFP ช่วยรักษาความเหมาะสมของเซลล์ A549 สำหรับการวิจัยทางเมแทบอลิซึมและเภสัชวิทยาดังกล่าว พร้อมทั้งช่วยให้สามารถสังเกตเห็นเซลล์ได้โดยตรง

A549-RFP ถูกใช้อย่างแพร่หลายในระบบการเพาะเลี้ยงร่วม (co-culture), แบบจำลองการปลูกถ่ายเนื้อเยื่อต่างชนิดในตำแหน่งปกติ (orthotopic) และตำแหน่งผิดปกติ (ectopic), รวมถึงการทดสอบการรุกรานหรือการแพร่กระจายของมะเร็ง ซึ่งการติดฉลากด้วยสารเรืองแสงช่วยให้สามารถแยกแยะเซลล์มะเร็งออกจากส่วนประกอบของเนื้อเยื่อเกี่ยวพันหรือส่วนประกอบของโฮสต์ได้ การเรืองแสงสีแดงที่เสถียรนี้สนับสนุนการใช้งานต่าง ๆ รวมถึงการถ่ายภาพเซลล์สด การคัดกรองแบบเนื้อหาสูง (high-content screening) การวัดปริมาณโดยใช้เทคนิคโฟลว์ไซโตเมทรี (flow cytometry) และการถ่ายภาพด้วยแสงในร่างกาย (in vivo optical imaging) ในฐานะตัวแปรที่สามารถติดตามได้ของแบบจำลองมะเร็งต่อมน้ำเหลืองปอดที่ได้รับการศึกษาอย่างละเอียด A549-RFP ให้แพลตฟอร์มที่มั่นคงสำหรับการศึกษาการเพิ่มจำนวนของเซลล์มะเร็ง การเปลี่ยนผ่านจากเซลล์เยื่อบุสู่เซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (epithelial-mesenchymal transition) การตอบสนองต่อยา และปฏิสัมพันธ์ระหว่างมะเร็งกับสภาพแวดล้อมจุลภาค ทั้งในสภาวะ in vitro และ in vivo

การดัดแปลงทางพันธุกรรม: ได้รับการดัดแปลงอย่างคงที่ผ่านกระบวนการถ่ายโอนด้วยเลนติไวรัสที่ไม่สามารถทำซ้ำได้ เพื่อแสดงโปรตีนเรืองแสงสีแดง (RFP) เป็นตัวรายงาน; รักษาไว้เป็นประชากรโพลีโคลนอลภายใต้การคัดเลือกด้วยพูโรไมซิน (1–5 µg/mL). ระดับความปลอดภัย S1/BSL-1

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.