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A549-RFP
Tissue
肺
Disease
肺腺癌
Synonyms
A 549, A549, NCI-A549, A549/ATCC, A549 ATCC, A549ATCC, hA549

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A549-RFP

Cell line · Product number 305659

A549-RFP is a fluorescently labeled derivative of the human A549 lung adenocarcinoma cell line, engineered to constitutively express red fluorescent prote...

US$800.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

A549-RFP 是人類 A549 肺腺癌細胞系的螢光標記衍生物,經基因工程改造後可持續表達紅色螢光蛋白(RFP),以便進行即時視覺化觀察與追蹤。 親本 A549 細胞系源自一名成年捐贈者的肺腺癌,呈現上皮形態並具有黏附生長特性。A549 細胞保留了 II 型肺泡上皮細胞的特徵,包括細胞角蛋白的表達以及產生表面活性劑相關蛋白的能力。 導入穩定的 RFP 表達載體,可在不顯著改變親本細胞系固有增殖與代謝特性的前提下,實現持續螢光表現,使 A549-RFP 適用於縱向成像研究。

在大型癌細胞面板中對 A549 細胞進行的功能表徵顯示,細胞大小、蛋白質含量及蛋白質合成速率與細胞體積呈正相關,且較大的細胞往往增殖較慢。 在比較分析中,A549 細胞屬於相對較小、增殖較快的上皮性癌細胞系,這與體積較大、更具間質特徵且表現出較高維曼汀(vimentin)表達及較低 E-鈣黏蛋白(E-cadherin)水平的細胞形成對比。 這些代謝與表型上的差異對於實驗結果的詮釋至關重要,因為蛋白質合成速率與代謝通量會隨細胞大小而變化,並影響細胞對針對增殖或 mTOR 調控的合成代謝途徑之藥劑的敏感性。RFP 修飾不僅保留了 A549 細胞用於此類代謝與藥理學研究的適用性,同時還能夠實現直接可視化。

A549-RFP 廣泛應用於共培養系統、原位及異位異種移植模型,以及侵襲或轉移實驗中;在這些應用中,螢光標記有助於區分腫瘤細胞與基質或宿主成分。 其穩定的紅色螢光支援多種應用,包括活細胞成像、高內容篩選、基於流式細胞術的定量分析,以及體內光學成像。 作為一個特性已充分闡明之肺腺癌模型的可追溯變異株,A549-RFP 提供了一個穩健的平台,可用於在體外及體內環境中研究腫瘤細胞增殖、上皮-間質轉化、藥物反應以及腫瘤-微環境相互作用。

基因改造:透過複製無能的慢病毒轉導進行穩定改造,以表達紅色螢光蛋白(RFP)報告基因;在嘌呤黴素(1–5 µg/mL)篩選下維持為多克隆細胞群。S1/BSL-1 防護等級。

Tissue
肺
Disease
肺腺癌
Synonyms
  • A 549
  • A549
  • NCI-A549
  • A549/ATCC
  • A549 ATCC
  • A549ATCC
  • hA549

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated red fluorescent protein (RFP) reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
20 至 40 小時

04Identifiers

Citation
A549-RFP(Cytion 型號 305659)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Expression and susceptibility

Antigen expression
RFP(紅色螢光蛋白)
Mutational profile
突變:p.Gly12Ser,純合子;突變:p.Gln37Ter,純合子

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12(1:1),重量比:3.1 g/L 葡萄糖,重量比:2.5 mM L-谷氨醯胺,重量比:15 mM HEPES,重量比:0.5 mM 丙酮酸鈉,重量比:1.2 g/L NaHCO₃ (Cytion 產品編號 820400a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基加上 10% 的二甲基亞砜(DMSO),以確保解凍後的細胞存活率達到適當水準。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
58年
Ethnicity
高加索人