A549-RFP

A549-RFPは、ヒトA549肺腺がん細胞株の蛍光標識誘導体であり、リアルタイムでの可視化および追跡を可能にするため、赤色蛍光タンパク質（RFP）を恒常的に発現するように改変されています。 親株であるA549細胞株は、成人ドナー由来の肺腺がんから樹立されたもので、上皮様形態を示し、付着性増殖特性を有しています。A549細胞は、サイトケラチンの発現やサーファクタント関連タンパク質の産生能力など、II型肺胞上皮細胞の特徴を保持しています。 安定したRFP発現カセットを導入したことで、親株固有の増殖および代謝特性を著しく変化させることなく持続的な蛍光発現が可能となり、A549-RFPは経時的イメージング研究に適しています。

大規模ながん細胞パネルにおける A549 細胞の機能的特性評価により、細胞サイズ、タンパク質含有量、およびタンパク質合成速度は細胞体積と正の相関があり、細胞が大きいほど増殖速度が遅くなる傾向があることが示されています。 比較分析では、A549 細胞は、ビメンチン発現が高く、E-カドヘリンレベルが低い、より大きく、より間葉系に似た細胞とは対照的に、比較的小さく、増殖の速い上皮性癌細胞株に分類されます。 タンパク質合成速度や代謝フラックスは細胞サイズに比例し、増殖や mTOR によって調節される同化経路を標的とする薬剤に対する感受性に影響を与えるため、こうした代謝的および表現型の違いは実験結果の解釈に関連しています。RFP 改変により、A549 細胞は、直接的な可視化が可能になりつつ、こうした代謝的および薬理学的調査に適した状態が維持されます。

A549-RFPは、共培養システム、同所性および異所性異種移植モデル、ならびに蛍光標識によって腫瘍細胞と間質細胞や宿主成分との識別が容易になる浸潤・転移アッセイなどで広く使用されています。 安定した赤色蛍光により、生細胞イメージング、ハイコンテンツスクリーニング、フローサイトメトリーに基づく定量、および生体内光学イメージングなどの応用が可能となる。 十分に特徴が解明されている肺腺癌モデルの追跡可能な変異体として、A549-RFP は、in vitro および in vivo の両環境において、腫瘍細胞の増殖、上皮間葉転換、薬剤反応、および腫瘍微小環境との相互作用を研究するための堅牢なプラットフォームを提供します。

遺伝子改変：複製不能レンチウイルスによる導入により、赤色蛍光タンパク質（RFP）レポーターを発現するよう安定的に改変されています。プテロマイシン（1～5 µg/mL）による選択下で、ポリクローナル集団として維持されています。S1/BSL-1 レベルでの封じ込め。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。