Prejsť na obsah
Bunky A549
Tkanivo
Pľúca
Choroba
Karcinóm
Synonymá
A 549, A-549, NCI-A549, hA54

Dokumenty

Bunky A549

Cell line · Číslo výrobku 300114

Bunky A549, získané z tkaniva pľúcneho adenokarcinómu, predstavujú primárny model používaný vo výskume rakoviny, najmä v biomedicínskych laboratóriách zameraných na pľúca...

€430.00bez DPH a poštovného
Na sklade
Lot
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
  • CoA
1

01Všeobecné informácie

Popis

Bunky A549 odvodené z pľúcneho adenokarcinómu sú základným modelom používaným vo výskume rakoviny, najmä v biomedicínskych laboratóriách zameraných na rakovinu pľúc. Bunky A549 sa bežne používajú ako model in vitro na štúdium biológie rakoviny pľúc, skríning liekov a účinky toxických zlúčenín.

V toxikologickom výskume predstavujú bunky A549 kontrolovaný experimentálny model, ktorý vedcom umožňuje skúmať mechanizmy, ktoré sú základom toxických účinkov a bunkových reakcií. Pochopením týchto mechanizmov môžu vedci lepšie posúdiť bezpečnosť látok a potenciálne zmierniť ich škodlivé účinky.

Karcinómové bunky A549 sa vo veľkej miere používajú ako in vitro model na štúdium patogenézy rakoviny pľúc a ako alternatívny model tkanivovej kultúry na rôzne výskumné štúdie súvisiace s pľúcami v biomedicínskych laboratóriách. Tieto bunky si zachovávajú vlastnosti alveolárnych epitelových buniek typu II a používajú sa na skúmanie reakcií epitelu na rôzne infekcie a zápalové podnety vrátane zápalu pľúc.

Okrem toho ľudská bunková línia A549 slúži ako cenný nástroj pri vývoji špecifických protilátok zameraných na proteíny alebo markery súvisiace s rakovinou pľúc. Vystavením týchto buniek zaujímavým látkam môžu výskumníci skúmať, ako ovplyvňujú životaschopnosť buniek, ich proliferáciu, apoptózu a iné bunkové procesy. Tieto informácie pomáhajú pri identifikácii potenciálnych terapeutických cieľov a vývoji nových spôsobov liečby rakoviny pľúc.

Karcinómové bunky A549 sú kľúčové vo výskume rakoviny, najmä pokiaľ ide o rakovinu pľúc, a slúžia ako in vitro model pre výskum rakoviny a toxikológie, vývoj účinných liečebných postupov a skríning liekov.

Tkanivo
Pľúca
Choroba
Karcinóm
Synonymá
  • A 549
  • A-549
  • NCI-A549
  • hA54

02Klasifikácia

Organizmus
Človek
Sex
Muž
Rastové vlastnosti
Prívrženec
Úroveň biologickej bezpečnosti
1

03Charakteristiky

Morfológia
Epitelu podobné
Karyotyp
Bunky A549 majú modálny počet chromozómov n2, pričom niektoré bunky majú 64 chromozómov.
Doba zdvojnásobenia
28 hodín

04Identifikátory

Citácia
A549 (katalógové číslo Cytion 300114)
Daňové identifikačné číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0023

05Prejav a náchylnosť

Expresia proteínov
P53 pozitívny
Izoenzýmy
G6PD, typ B
Reverzná transkriptáza
Negatívne

06Manipulácia a kultivácia

Kultivačné médium
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glukózy, w: 2,5 mM L-glutamínu, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM pyruvátu sodného, w: 1,2 g/l NaHCO3 (číslo výrobku Cytion 820400a)
Inkubačná atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplnky stravy
Doplňte médium o 10 % FBS
Disociačné činidlo
Accutase
Rozmnožovanie kultúr
Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buniek/cm2
Obnova kvapaliny
2 až 3-krát týždenne
Zotavenie po rozmrazení
Po rozmrazení naneste bunky v koncentrácii 5 x 104 buniek/cm2 a nechajte bunky zotaviť sa z procesu zmrazenia a prilnúť aspoň 24 hodín.
Rozmrazovanie a kultivácia
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervácia

Sterilita

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Mrazové médium
Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
Podmienky skladovania

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Dopravné podmienky

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

08Darca

Vek darcu
58 rokov
Etnická príslušnosť
Kaukazský