NCI-H1299

NCI-H1299, známa aj ako H1299, je ľudská bunková línia nemalobunkového karcinómu pľúc (NSCLC), ktorá bola izolovaná z metastázy v lymfatických uzlinách dospelého mužského pacienta s karcinómom pľúc. Spolu s bunkami H292 sa H1299 široko využíva ako model NSCLC vo výskume biológie rakoviny a imuno-onkológie. Bunková línia vykazuje epiteliálnu morfológiu charakterizovanú adhezívnymi, sploštenými bunkami s hrúbkou menšou ako 5 µm a približným zdvojnásobením za 22–30 hodín. Bunky H1299 exprimujú keratín a vimentín, ale sú negatívne na neurofilamentový tripletový proteín, čo odráža fenotyp s epiteliálnymi aj mezenchýmovými charakteristikami.

Z genetického hľadiska bunky H1299 obsahujú homozygotnú čiastočnú deléciu v géne TP53, čo má za následok úplnú stratu expresie proteínu p53. Táto línia sa vyznačuje aj divokým typom KRAS, čím sa odlišuje od iných modelov NSCLC, ako sú bunky A549, ktoré nesú endogénne mutácie KRAS. Vzhľadom na absenciu funkčnej p53 signalizácie v kombinácii s intaktným KRAS sa bunky H1299 často používajú na štúdium biológie tumorových supresorov, onkogénnych signálnych dráh, apoptózy, metastázovania a mechanizmov terapeutickej rezistencie. V porovnaní s viac epiteliálnymi bunkovými líniami NSCLC, ako sú A549, bunky H1299 vykazujú viac mezenchýmový fenotyp so zníženou expresiou epiteliálnych markerov, čo ich robí obzvlášť užitočnými pre výskum epiteliálno-mezenchýmovej transformácie (EMT), invázie a metastatického progresu.

Bolo tiež zaznamenané, že bunky H1299 syntetizujú neuropeptid neuromedín B (NMB) v nízkych hladinách, pričom nemajú zistiteľnú produkciu peptidu uvoľňujúceho gastrín (GRP). Ich robustné rastové charakteristiky, vysoká transfekovateľnosť a dobre charakterizované molekulárne pozadie prispeli k ich širokému využitiu v štúdiách týkajúcich sa cielených terapií, úpravy génov, imunitou sprostredkovanej cytotoxicity a nadväzujúcich signálnych dráh spojených s KRAS. Rovnako ako pri všetkých modeloch nádorových buniek kultivovaných dlhodobo, odporúča sa pravidelné overovanie a potvrdzovanie kľúčových molekulárnych vlastností, aby sa zabezpečila reprodukovateľnosť experimentov.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke