NCI-H1299

NCI-H1299, ook bekend als H1299, is een menselijke celijn van niet-kleincellige longkanker (NSCLC) die is geïsoleerd uit een lymfekliermetastase van een volwassen mannelijke patiënt met longcarcinoom. Samen met H292-cellen wordt H1299 op grote schaal gebruikt als NSCLC-model in onderzoek op het gebied van kankerbiologie en immuno-oncologie. De cellijn vertoont een epitheelachtige morfologie die wordt gekenmerkt door hechtende, afgeplatte cellen met een dikte van minder dan 5 µm en een verdubbelingstijd van ongeveer 22–30 uur. H1299-cellen brengen keratine en vimentine tot expressie, maar zijn negatief voor neurofilament-triplet-eiwit, wat een fenotype weerspiegelt met zowel epitheliale als mesenchymale kenmerken.

Genetisch gezien vertonen H1299-cellen een homozygote partiële deletie in het TP53-gen, wat resulteert in een volledig verlies van p53-eiwitexpressie. De lijn wordt ook gekenmerkt door een wildtype KRAS-status, waardoor deze zich onderscheidt van andere NSCLC-modellen zoals A549-cellen, die endogene KRAS-mutaties dragen. Vanwege de afwezigheid van functionele p53-signalering in combinatie met intact KRAS, worden H1299-cellen vaak gebruikt voor onderzoek naar tumorsuppressorbiologie, oncogene signaalroutes, apoptose, metastase en mechanismen van therapeutische resistentie. In vergelijking met meer epitheliale NSCLC-cellijnen zoals A549 vertonen H1299-cellen een meer mesenchymale fenotype met verminderde expressie van epitheliale markers, waardoor ze bijzonder nuttig zijn voor onderzoek naar epitheliale-naar-mesenchymale transitie (EMT), invasie en metastatische progressie.

Er is ook gemeld dat H1299-cellen het neuropeptide neuromedine B (NMB) in lage concentraties synthetiseren, terwijl er geen detecteerbare productie van gastrine-afgevend peptide (GRP) plaatsvindt. Hun robuuste groeikenmerken, hoge transfectie-eigenschappen en goed gekarakteriseerde moleculaire achtergrond hebben bijgedragen aan hun brede toepassing in studies met betrekking tot gerichte therapieën, genbewerking, immuungemedieerde cytotoxiciteit en KRAS-geassocieerde signaalroutes. Zoals bij alle langdurig gekweekte tumorcelmodellen wordt periodieke authenticatie en bevestiging van belangrijke moleculaire kenmerken aanbevolen om de reproduceerbaarheid van experimenten te waarborgen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring