NCI-H1975

De NCI-H1975 cellijn is een beproefd model afgeleid van humaan niet-kleincellig longcarcinoom (NSCLC), specifiek adenocarcinoom. Deze cellijn is vooral belangrijk vanwege de dubbele mutaties in het gen voor de epidermale groeifactorreceptor (EGFR). Ze bevat de L858R activerende mutatie in exon 21 en de T790M mutatie in exon 20, die resistentie geeft tegen eerste-generatie tyrosinekinaseremmers (TKI's) zoals gefitinib en erlotinib. Deze genetische eigenschappen maken NCI-H1975 een waardevol hulpmiddel voor het bestuderen van resistentiemechanismen tegen geneesmiddelen en het testen van EGFR-remmers van de volgende generatie.

De T790M-mutatie verandert de ATP-bindingszak van EGFR, waardoor de werkzaamheid van eerdere EGFR-remmers afneemt terwijl de receptorsignaleringsactiviteit behouden blijft. Deze eigenschap heeft geleid tot onderzoek naar derde-generatie remmers, zoals osimertinib, die zich selectief richten op T790M mutant EGFR terwijl wild-type EGFR gespaard blijft, waardoor off-target effecten worden verminderd. Studies met NCI-H1975 hebben bijgedragen aan het begrip van de structurele en functionele effecten van deze mutaties op EGFR-gemedieerde signaalroutes, inclusief downstream effecten op PI3K/AKT en RAS/RAF/MEK/ERK routes, die cruciaal zijn voor de proliferatie en overleving van tumorcellen.

Naast zijn rol in onderzoek naar resistentie tegen geneesmiddelen wordt NCI-H1975 gebruikt in preklinische evaluaties van combinatietherapieën die erop gericht zijn resistentie te overwinnen door meerdere routes aan te pakken. Haar goed gekarakteriseerde genetische en moleculaire profiel, inclusief gedetailleerde gegevens over kopiegetalvariaties en mutatielandschappen, heeft haar status als essentieel model voor het bestuderen van de biologie van NSCLC en therapeutische ontwikkeling verstevigd.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring