NCI-H1975

Клетъчната линия NCI-H1975 е утвърден модел, получен от човешки недребноклетъчен белодробен карцином (НДКБК), по-специално аденокарцином. Тази клетъчна линия е особено значима поради двойните си мутации в гена на рецептора за епидермален растежен фактор (EGFR). Тя съдържа активиращата мутация L858R в екзон 21 и мутацията T790M в екзон 20, които придават резистентност към тирозин киназните инхибитори (ТКИ) от първо поколение като гефитиниб и ерлотиниб. Тези генетични характеристики правят NCI-H1975 ценен инструмент за изучаване на механизмите на лекарствена резистентност и тестване на следващо поколение инхибитори на EGFR.

Мутацията T790M променя джоба за свързване на АТФ на EGFR, като намалява ефикасността на по-ранните инхибитори на EGFR, като същевременно запазва сигналната активност на рецептора. Това свойство стимулира изследванията на инхибитори от трето поколение, като например osimertinib, които селективно въздействат върху мутиралия T790M EGFR, като същевременно щадят дивия тип EGFR, намалявайки ефектите извън целта. Проучванията с NCI-H1975 допринесоха за разбирането на структурните и функционалните въздействия на тези мутации върху сигналните пътища, медиирани от EGFR, включително последващите ефекти върху PI3K/AKT и RAS/RAF/MEK/ERK пътищата, които са ключови за пролиферацията и оцеляването на туморните клетки.

В допълнение към ролята си в изследванията на лекарствената резистентност, NCI-H1975 се използва в предклиничните оценки на комбинирани терапии, които целят преодоляване на резистентността чрез въздействие върху множество пътища. Неговият добре характеризиран генетичен и молекулярен профил, включващ подробни данни за вариациите в броя на копията и мутационните ландшафти, затвърди статута му на основен модел в изследването на биологията на NSCLC и разработването на терапии.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация