NCI-H1975

Cellinjen NCI-H1975 är en väletablerad modell som härrör från humant icke-småcelligt lungkarcinom (NSCLC), specifikt adenokarcinom. Denna cellinje är särskilt betydelsefull på grund av sina dubbla mutationer i EGFR-genen (epidermal growth factor receptor). Den har den aktiverande mutationen L858R i exon 21 och mutationen T790M i exon 20, som ger resistens mot första generationens tyrosinkinashämmare (TKI) som gefitinib och erlotinib. Dessa genetiska egenskaper gör NCI-H1975 till ett värdefullt verktyg för att studera mekanismer för läkemedelsresistens och testa nästa generations EGFR-hämmare.

T790M-mutationen förändrar den ATP-bindande fickan hos EGFR, vilket minskar effekten av tidigare EGFR-hämmare samtidigt som receptorns signalaktivitet bibehålls. Denna egenskap har drivit fram forskning kring tredje generationens hämmare, såsom osimertinib, som selektivt riktar in sig på T790M-muterad EGFR samtidigt som vildtyp EGFR skonas, vilket minskar off-target-effekter. Studier med NCI-H1975 har bidragit till förståelsen av de strukturella och funktionella effekterna av dessa mutationer på EGFR-medierade signalvägar, inklusive nedströmseffekter på PI3K/AKT- och RAS/RAF/MEK/ERK-vägarna, som är centrala för tumörcellernas proliferation och överlevnad.

Utöver sin roll i forskningen kring läkemedelsresistens används NCI-H1975 i prekliniska utvärderingar av kombinationsbehandlingar som syftar till att övervinna resistens genom att påverka flera olika signalvägar. Dess väl karakteriserade genetiska och molekylära profil, inklusive detaljerade data om kopietalsvariationer och mutationslandskap, har befäst dess status som en viktig modell för studier av NSCLC:s biologi och utveckling av behandlingar.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring