NCI-H1975

สายเซลล์ NCI-H1975 เป็นแบบจำลองที่ได้รับการยอมรับอย่างกว้างขวางซึ่งได้มาจากมะเร็งปอดชนิดไม่ใช่เซลล์เล็ก (NSCLC) โดยเฉพาะอย่างยิ่งชนิดอะดีโนคาร์ซิโนมา สายเซลล์นี้มีความสำคัญเป็นพิเศษเนื่องจากการกลายพันธุ์สองตำแหน่งในยีนตัวรับปัจจัยการเจริญเติบโตของผิวหนัง (EGFR)มันมีกลายพันธุ์กระตุ้น L858R ในเอ็กซอน 21 และกลายพันธุ์ T790M ในเอ็กซอน 20 ซึ่งทำให้เกิดความต้านทานต่อตัวยับยั้งไทโรซีนไคเนส (TKIs) รุ่นแรก เช่น gefitinib และ erlotinib ลักษณะทางพันธุกรรมเหล่านี้ทำให้ NCI-H1975 เป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าในการศึกษาวิธีการต้านยาและทดสอบตัวยับยั้ง EGFR รุ่นถัดไป

การกลายพันธุ์ T790M เปลี่ยนแปลงช่องจับ ATP ของ EGFR ทำให้ประสิทธิภาพของตัวยับยั้ง EGFR รุ่นก่อนลดลง ในขณะที่ยังคงกิจกรรมการส่งสัญญาณของตัวรับไว้ คุณสมบัตินี้ได้ผลักดันการวิจัยไปสู่ตัวยับยั้งรุ่นที่สาม เช่น osimertinib ซึ่งมุ่งเป้าไปที่ EGFR ที่กลายพันธุ์ T790M อย่างเฉพาะเจาะจง ในขณะที่หลีกเลี่ยง EGFR ชนิดปกติ ลดผลกระทบที่ไม่ตรงเป้าหมายการศึกษาโดยใช้ NCI-H1975 ได้มีส่วนช่วยในการทำความเข้าใจผลกระทบทั้งด้านโครงสร้างและหน้าที่ของการกลายพันธุ์เหล่านี้ต่อเส้นทางการส่งสัญญาณที่ผ่าน EGFR รวมถึงผลกระทบต่อเส้นทาง PI3K/AKT และ RAS/RAF/MEK/ERK ซึ่งเป็นเส้นทางสำคัญในการเพิ่มจำนวนและการอยู่รอดของเซลล์มะเร็ง

นอกเหนือจากบทบาทในการวิจัยการดื้อยาแล้ว NCI-H1975 ยังถูกนำมาใช้ในการประเมินก่อนการทดลองทางคลินิกของการบำบัดแบบผสมผสานที่มีเป้าหมายเพื่อเอาชนะการดื้อยาโดยการโจมตีหลายเส้นทางพร้อมกัน ลักษณะทางพันธุกรรมและโมเลกุลที่ได้รับการศึกษาอย่างดี รวมถึงข้อมูลที่ละเอียดเกี่ยวกับการเปลี่ยนแปลงจำนวนสำเนาของยีนและภูมิทัศน์ของการกลายพันธุ์ ได้ทำให้สถานะของมันแข็งแกร่งขึ้นในฐานะแบบจำลองที่สำคัญในการศึกษาชีววิทยาของ NSCLC และการพัฒนาการรักษา

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.