NCI-H1975

NCI-H1975-solulinja on vakiintunut malli, joka on peräisin ihmisen ei-pienisoluisesta keuhkosyövästä (NSCLC), erityisesti adenokarsinoomasta. Tämä solulinja on erityisen merkittävä, koska siinä on kaksi mutaatiota epidermisen kasvutekijän reseptorin (EGFR) geenissä. Siinä on eksonissa 21 aktivoiva L858R-mutaatio ja eksonissa 20 T790M-mutaatio, jotka aiheuttavat resistenssin ensimmäisen sukupolven tyrosiinikinaasin estäjille (TKI), kuten gefitinibille ja erlotinibille. Nämä geneettiset ominaisuudet tekevät NCI-H1975:stä arvokkaan välineen lääkeresistenssimekanismien tutkimiseen ja seuraavan sukupolven EGFR-estäjien testaamiseen.

T790M-mutaatio muuttaa EGFR:n ATP:tä sitovaa taskua, mikä vähentää aiempien EGFR:n estäjien tehoa säilyttäen samalla reseptorin signalointiaktiivisuuden. Tämä ominaisuus on johtanut kolmannen sukupolven inhibiittoreiden, kuten osimertinibin, tutkimukseen. Nämä inhibiittorit kohdistuvat valikoivasti T790M-mutaatio EGFR:ään ja säästävät samalla villityyppistä EGFR:ää, mikä vähentää vaikutusten kohdistumista muuhun kuin kohteeseen. NCI-H1975:llä tehdyt tutkimukset ovat auttaneet ymmärtämään näiden mutaatioiden rakenteellisia ja toiminnallisia vaikutuksia EGFR:n välittämiin signaalireitteihin, mukaan luettuina vaikutukset PI3K/AKT- ja RAS/RAF/MEK/ERK-reitteihin, jotka ovat keskeisiä kasvainsolujen lisääntymisen ja eloonjäämisen kannalta.

Sen lisäksi, että NCI-H1975:tä käytetään lääkeresistenssin tutkimuksessa, sitä käytetään sellaisten yhdistelmähoitojen prekliinisissä arvioinneissa, joilla pyritään voittamaan resistenssi kohdistamalla se useisiin reitteihin. Sen hyvin karakterisoitu geneettinen ja molekyyliprofiili, mukaan lukien yksityiskohtaiset tiedot kopiomäärävaihteluista ja mutaatiomaisemista, on vahvistanut sen asemaa keskeisenä mallina NSCLC:n biologian ja terapeuttisen kehityksen tutkimuksessa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa