.jpg)
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Keuhkojen suurisoluinen karsinooma
- Metastaasikohde
- Pleuraeffuusio
- Synonyymit
- NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460
Asiakirjat
NCI-H460
Cell line · Tuotenumero 305020
NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...
Räätälöinti / Suositukset
- NCI-H460Cell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
- NCI-H460, joka tunnetaan myös nimellä H460, on peräisin miespotilaalta, jolla oli suurisoluinen keuhkosyöpä. NCI-H460-solut ovat adherenttejä soluja, jotka kasvavat kaksi kertaa nopeammin kuin A549-solut, ja niiden kaksinkertaistumisaika on 33 tuntia RPMI 1640:ssä, jota on täydennetty 10 prosentilla FBS:ää. Ne voivat muodostaa kasvaimia sekä in vitro- että in vivo -malleissa, kuten nude-hiirillä. NCI-H460-solujen on osoitettu ilmentävän p53-mRNA:ta korkeilla tasoilla, jotka ovat verrattavissa normaaliin keuhkokudokseen, mutta niissä ei esiinny karkeaa rakenteellista DNA-poikkeavuutta. Ne värjäytyvät positiivisesti keratiinille ja vimentiinille, mutta ovat negatiivisia neurofilamentti-triplet-proteiinille. Isoentsyymianalyysi on osoittanut, että HPRT on lokalisoitunut näiden ei-pienisoluisten keuhkosyöpäsolulinjojen pinnalle. AK-1-, ES-D- ja Me-2-isoentsyymit ilmentyvät tasolla 1, kun taas G6PD- ja PGM1- ja PGM3-isoentsyymit ilmentyvät tasoilla B ja 1-2. Soluilla on hypotriploidinen karyotyyppi, jonka modaalinen kromosomiluku on 57, vaihteluväli 53-65. Seitsemän merkkikromosomia on yhteistä kaikille soluille, mukaan lukien der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22). Koska solut ilmentävät runsaasti p53-mRNA:ta, ne ovat sopiva malli ei-pienisoluisen keuhkosyövän molekyylimekanismien tutkimiseen.
- Kudos
- Keuhkot
- Sairaus
- Keuhkojen suurisoluinen karsinooma
- Metastaasikohde
- Pleuraeffuusio
- Synonyymit
- NCI-H460
- NCI.H460
- H-460
- NCIH460
- NCI-HUT-460
- NCI-460
02Luokittelu
- Organismi
- Ihminen
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteeli
- Kasvaimia aiheuttava
- Kyllä
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- H-460 (Cytionin luettelonumero 305020)
- NCBI-verotunnus
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0459
05Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
07Lahjoittaja
- Etnisyys
- Eurooppalainen
08Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä
.jpg)
.jpg)
