.jpg)
- Audums
- Plaušas
- Slimība
- Plaušu lielšūnu karcinoma
- Metastāžu vieta
- Pleiras izsvīdums
- Sinonīmi
- NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460
Dokumenti
NCI-H460
Cell line · Preces numurs 305020
NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...
Pielāgošana / Ieteikumi
- NCI-H460Cell line€430.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
- NCI-H460, pazīstams arī kā H460, tika iegūts no vīrieša pacienta ar lielšūnu plaušu karcinomu. NCI-H460 šūnas ir adherentas šūnas, kas aug divreiz ātrāk nekā A549 šūnas, un to dubultošanās laiks ir 33 stundas RPMI 1640, kas papildināta ar 10 % FBS. Tās var veidot audzējus gan in vitro, gan in vivo modeļos, tostarp nude pelēm. Ir pierādīts, ka NCI-H460 šūnas ekspresē p53 mRNS augstā līmenī, kas ir salīdzināms ar normālu plaušu audu līmeni, bet tām nav nekādu rupju DNS struktūras anomāliju. Tās pozitīvi krāsojas uz keratīna un vimentīna, bet ir negatīvas uz neirofilamentu tripleta proteīna. Izoenzīmu analīze ir parādījusi, ka HPRT ir lokalizēts uz šo plaušu vēža šūnu līniju, kas nav mazo šūnu vēža līnijas, virsmas. AK-1, ES-D un Me-2 izoenzīmi ir izteikti 1. līmenī, bet G6PD un PGM1 un PGM3 izoenzīmi ir izteikti attiecīgi B un 1-2 līmenī. Šīm šūnām ir hipotriploīds kariotips ar 57 hromosomu skaitu, kas svārstās no 53 līdz 65 hromosomām. Septiņas marķieru hromosomas ir kopīgas visām šūnām, tostarp der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22). To augstais p53 mRNS ekspresijas līmenis padara tās par piemērotu modeli, lai pētītu nesmalikocelulārā plaušu vēža molekulāros mehānismus.
- Audums
- Plaušas
- Slimība
- Plaušu lielšūnu karcinoma
- Metastāžu vieta
- Pleiras izsvīdums
- Sinonīmi
- NCI-H460
- NCI.H460
- H-460
- NCIH460
- NCI-HUT-460
- NCI-460
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 1
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlija
- Tumorogēns
- Jā
04Identifikatori
- Atsauce
- H-460 (Cytion kataloga numurs 305020)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0459
05Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Šķidruma atjaunošana
- 2 līdz 3 reizes nedēļā
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
07Ziedotājs
- Etniskā piederība
- Eiropas
08Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā


.jpg)


.jpg)


