Pāriet uz saturu
NCI-H716
Audums
Cecum
Slimība
Cekuma adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Ascīts
Sinonīmi
NCI H716, NCI-H716, H-716, NCIH716

Dokumenti

NCI-H716

Cell line · Preces numurs 305079

The NCI-H716 cell line is a human adenocarcinoma cell line derived from the colon. It was established from the metastatic site in the ascites of a 33-year...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

NCI-H716 šūnu līnija ir cilvēka adenokarcinomas šūnu līnija, kas iegūta no resnās zarnas. Tā tika izveidota no 33 gadus veca vīrieša, kas ir baltādains, ascīta metastāžu vietas. Viena no NCI-H716 šūnu līnijas raksturīgajām īpašībām ir tās spēja ekspresēt un izdalīt enteroendokrīnos hormonus, īpaši glikagonam līdzīgo peptīdu 1 (GLP-1), kas padara to ļoti nozīmīgu zarnu hormonu fizioloģijas un enteroendokrīnās sistēmas pētniecībā. Šis aspekts ir ļoti svarīgs diabēta pētniecībā, jo īpaši saistībā ar insulīna sekrēcijas un glikozes homeostāzes hormonālās regulācijas izpēti.

Šīs šūnas ir pielāgotas augšanai peldošos agregātos vai suspensijas kultūrā, kas ir nedaudz neparasti epitēlija izcelsmes šūnām. Spēja augt suspensijā ļauj pētīt šūnu mijiedarbību un signālu ceļus trīsdimensiju kultūras vidē, kas var precīzāk atdarināt in vivo apstākļus nekā tradicionālās monoslāņa kultūras. NCI-H716 šūnu līnija ir plaši izmantota, lai pētītu signālu pārneses ceļus, kas saistīti ar hormonu sekrēciju, reakciju uz farmakoloģiskiem līdzekļiem un zarnu epitēlija šūnu un mikrobiotas mijiedarbību. Pētījumi, kuros izmantota šī šūnu līnija, ir ievērojami veicinājuši izpratni par kuņģa un zarnu trakta slimību patofizioloģiju un terapeitisko stratēģiju izstrādi, kas vērstas uz zarnu un smadzeņu asi.

Turklāt NCI-H716 šūnas tiek izmantotas, lai pārbaudītu terapeitisko savienojumu potenciālo ietekmi uz sekrēciju un receptoru reakciju. To unikālais hormonālais profils ļauj tās izmantot arī farmakodinamikas pētījumos un zāļu atklāšanā saistībā ar vielmaiņas traucējumiem un aptaukošanos. Tādējādi NCI-H716 kalpo kā būtisks instruments translatoloģiskajā medicīnā, kas savieno fundamentālos pētījumus un klīnisko pielietojumu kuņģa un zarnu trakta un vielmaiņas slimību jomā.

Audums
Cecum
Slimība
Cekuma adenokarcinoma
Metastāžu vieta
Ascīts
Sinonīmi
  • NCI H716
  • NCI-H716
  • H-716
  • NCIH716

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Adhēzija un suspensija
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlija
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
50 stundas

04Identifikatori

Atsauce
NCI-H716 (Cytion kataloga numurs 305079)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1581

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Pārstādīšana
Viegli homogenizējiet šūnu suspensiju kolbā, pipetējot uz augšu un uz leju, pēc tam ņemiet reprezentatīvu paraugu, lai noteiktu šūnu blīvumu uz ml. Atšķaidiet suspensiju, lai sasniegtu šūnu koncentrāciju 1 x 105 šūnas/ml ar svaigu kultūras barotni, un sadaliet pielāgoto suspensiju jaunās kolbās turpmākai kultivēšanai.
Sēšanas blīvums
> 3 x 105 šūnas/ml
Šķidruma atjaunošana
Katru dienu pievieno 1 ml svaigas barotnes, nedēļas nogales var izlaist, un pēc vajadzības ar pipeti atdaliet klasterus
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
33 gadi
Etniskā piederība
Eiropas