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NCI-H716
Tecido
Cecum
Doença
Adenocarcinoma do ceco
Local da metástase
Ascite
Sinónimos
NCI H716, NCI-H716, H-716, NCIH716

Documentos

NCI-H716

Cell line · Número do produto 305079

The NCI-H716 cell line is a human adenocarcinoma cell line derived from the colon. It was established from the metastatic site in the ascites of a 33-year...

€430.00sem impostos nem portes de envio

Personalização / Recomendações

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1

01Informações gerais

Descrição

A linha celular NCI-H716 é uma linha celular de adenocarcinoma humano derivada do cólon. Foi estabelecida a partir do local metastático na ascite de um homem caucasiano de 33 anos. Uma das caraterísticas que definem a linha celular NCI-H716 é a sua capacidade de exprimir e segregar hormonas enteroendócrinas, nomeadamente o péptido 1 semelhante ao glucagon (GLP-1), o que a torna altamente relevante para o estudo da fisiologia das hormonas intestinais e do sistema enteroendócrino. Este aspeto é crucial para a investigação sobre a diabetes, especialmente no contexto da investigação da regulação hormonal da secreção de insulina e da homeostase da glucose.

Estas células estão adaptadas para crescer como agregados flutuantes ou em cultura em suspensão, o que é algo invulgar para as células derivadas do epitélio. A capacidade de crescer em suspensão permite o estudo das interações celulares e das vias de sinalização num ambiente de cultura tridimensional, que pode imitar as condições in vivo mais de perto do que as culturas tradicionais em monocamada. A linha celular NCI-H716 tem sido amplamente utilizada para explorar as vias de transdução de sinal envolvidas na secreção de hormonas, na resposta a agentes farmacológicos e na interação entre as células epiteliais intestinais e o microbiota. Os estudos efectuados com esta linha celular contribuíram significativamente para a compreensão da fisiopatologia das doenças gastrointestinais e para o desenvolvimento de estratégias terapêuticas que visam o eixo intestino-cérebro.

Além disso, as células NCI-H716 são utilizadas para testar compostos terapêuticos quanto aos seus potenciais efeitos na secreção e na resposta dos receptores. O seu perfil hormonal único permite também a sua utilização em estudos farmacodinâmicos e na descoberta de medicamentos relacionados com perturbações metabólicas e obesidade. Assim, as células NCI-H716 constituem uma ferramenta vital na medicina translacional, fazendo a ponte entre a investigação fundamental e as aplicações clínicas nas doenças gastrointestinais e metabólicas.

Tecido
Cecum
Doença
Adenocarcinoma do ceco
Local da metástase
Ascite
Sinónimos
  • NCI H716
  • NCI-H716
  • H-716
  • NCIH716

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Adesão e suspensão
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial
Tempo de duplicação
50 horas

04Identificadores

Referência
NCI-H716 (número de catálogo Cytion 305079)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1581

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,0 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Subcultura
Homogeneize suavemente a suspensão celular no frasco pipetando para cima e para baixo e, em seguida, recolha uma amostra representativa para determinar a densidade celular por ml. Dilua a suspensão para atingir uma concentração celular de 1 x 105 células/ml com meio de cultura fresco e alique a suspensão ajustada em novos frascos para cultivo adicional.
Densidade de sementeira
> 3 x 105 células/ml
Renovação de fluidos
Adicionar diariamente 1 ml de meio fresco, podendo ser omitidos os fins-de-semana, e separar os aglomerados por pipetagem, conforme necessário
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Idade do dador
33 anos
Etnia
Europeu