Mine otse sisu juurde
NCI-H716
Kude
Cecum
Haigus
Cecum adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Astsiit
Sünonüümid
NCI H716, NCI-H716, H-716, NCIH716

Dokumendid

NCI-H716

Cell line · Toote number 305079

The NCI-H716 cell line is a human adenocarcinoma cell line derived from the colon. It was established from the metastatic site in the ascites of a 33-year...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H716 rakuliin on inimese adenokartsinoomi rakuliin, mis on saadud käärsoolest. See loodi 33-aastase kaukaasia mehe astsiidi metastaatilisest asukohast. NCI-H716 rakuliini üks iseloomulikke omadusi on selle võime ekspresseerida ja eritada enteroendokriinset hormooni, eelkõige glükagoonilaadset peptiidi 1 (GLP-1), mis muudab selle väga oluliseks soolestiku hormoonide füsioloogia ja enteroendokriinsüsteemi uurimisel. See aspekt on oluline diabeediuuringute jaoks, eriti seoses insuliini sekretsiooni ja glükoosi homöostaasi hormonaalse regulatsiooni uurimisega.

Need rakud on kohandatud kasvama hõljuvate agregaatidena või suspensioonikultuuris, mis on epiteelidest saadud rakkude puhul mõnevõrra ebatavaline. Võimalus kasvada suspensioonis võimaldab uurida rakkude vastastikmõju ja signaaliradu kolmemõõtmelises kultuurikeskkonnas, mis võib in vivo tingimusi paremini jäljendada kui traditsioonilised monokihilised kultuurid. NCI-H716 rakuliini on laialdaselt kasutatud hormoonide sekretsiooni, farmakoloogilistele ainetele reageerimise ning soole epiteelirakkude ja mikrobioota vahelise koostoime uurimiseks. Seda rakuliini kasutades tehtud uuringud on oluliselt kaasa aidanud seedetrakti haiguste patofüsioloogia mõistmisele ja soole-aju teljele suunatud ravistrateegiate väljatöötamisele.

Lisaks kasutatakse NCI-H716 rakke terapeutiliste ühendite testimiseks nende võimaliku mõju suhtes sekretsioonile ja retseptorivastusele. Nende ainulaadne hormonaalne profiil võimaldab kasutada neid ka farmakodünaamilistes uuringutes ja ravimite avastamisel seoses ainevahetushäirete ja rasvumisega. Seega on NCI-H716 oluline vahend translatiivses meditsiinis, mis ühendab alusuuringuid ja kliinilisi rakendusi seedetrakti ja ainevahetushaiguste valdkonnas.

Kude
Cecum
Haigus
Cecum adenokartsinoom
Metastaaside asukoht
Astsiit
Sünonüümid
  • NCI H716
  • NCI-H716
  • H-716
  • NCIH716

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Adhesiivne ja suspensioon
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteel
Kahekordistumisaeg
50 tundi

04Tunnused

Viide
NCI-H716 (Cytioni katalooginumber 305079)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1581

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Kultuuri edasikasvatamine
Homogeniseerige kolvis olev rakususpensioon õrnalt pipeteerides üles-alla, seejärel võtke representatiivne proov, et määrata rakkude tihedus ml kohta. Lahjendage suspensiooni värske kultuurikeskkonnaga, et saavutada rakkude kontsentratsioon 1 x 105 rakku/ml, ja jaotage reguleeritud suspensioon uute kolvide vahel edasiseks kasvatamiseks.
Külvitihedus
> 3 x 105 rakku/ml
Vedeliku vahetus
Lisage iga päev 1 ml värsket keskkonda, nädalavahetuse võib ära jätta, ja eraldage klastrid vastavalt vajadusele pipeteerimise teel
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
33 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa