Mine otse sisu juurde
NCI-H196
Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Sünonüümid
NCI-H196, H-196, NCIH196

Dokumendid

NCI-H196

Cell line · Toote number 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

NCI-H196 on väikeserakkuline kopsuvähk (SCLC), mida kasutatakse vähi progresseerumise, kemoteraapia resistentsuse ja rakkude vastuste uurimiseks oksüdatiivsele stressile. NCI-H196-ga tehtud uuringud on näidanud selle tundlikkust pürrolidiiniditiokarbamaadi (PDTC), mis on prooksüdantne aine, tsütotoksilise toime suhtes. PDTC kutsub esile S-faasi rakutsükli peatumise ja vähendab oluliselt NCI-H196 rakkude elujõulisust annusest sõltuvalt. See tsütotoksilisus on tingitud oksüdatiivse stressi indutseerimisest, mida tõendavad suurenenud reaktiivsed hapnikuliigid (ROS) ja muutused oksüdatiivse stressiga seotud geenide ekspressioonis. Antioksüdantide, nagu N-atsetüül-L-tsüsteiini (NAC) lisamine võib tõhusalt muuta PDTC poolt indutseeritud tsütotoksilisust, mis kinnitab oksüdatiivse stressi rolli rakusurmas.

Edasised uuringud on näidanud, et PDTC suurendab tsisplatiini, SCLC raviks kasutatava esimese rea kemoteraapia ravimi tsütotoksilisust. Tsisplatiini väikeste annuste kombineerimine PDTC mittetoksiliste kontsentratsioonidega põhjustab NCI-H196 rakkudes sünergilist tsütotoksilisust. Arvatakse, et see kombinatsiooniteraapia on tõhus tänu sellele, et PDTC vähendab ATP7A, vase väljavoolutransporteri, mida seostatakse tsisplatiiniresistentsusega. ATP7A inhibeerimise kaudu võib PDTC suurendada rakusisest vaske ja tundlikustada NCI-H196 rakke tsisplatiini suhtes, mis näitab selle potentsiaali täiendava ravina SCLC puhul.

Kude
Kopsud
Haigus
Kopsu väikerakk-kartsinoom
Metastaaside asukoht
Pleuraefusioon
Rakendused
3D rakukultuur, vähiuuringud
Sünonüümid
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
NCI-H196 (Cytioni katalooginumber 300390)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

06Annetaja

Doonori vanus
68 aastat
Etniline kuuluvus
Euroopa