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NCI-H196
Gewebe
Lunge
Krankheit
Kleinzelliges Bronchialkarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Synonyme
NCI-H196, H-196, NCIH196

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NCI-H196

Cell line · Artikelnummer 300390

NCI-H196 is a small-cell lung cancer (SCLC) cell line used to study the mechanisms of cancer progression, chemotherapy resistance, and cellular responses ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

NCI-H196 ist eine Zelllinie des kleinzelligen Lungenkrebses (SCLC), die zur Untersuchung der Mechanismen des Krebsfortschritts, der Chemotherapieresistenz und der zellulären Reaktionen auf oxidativen Stress verwendet wird. Forschungen mit NCI-H196 haben gezeigt, dass es empfindlich auf die zytotoxischen Wirkungen von Pyrrolidindithiocarbamat (PDTC), einem pro-oxidativen Wirkstoff, reagiert. PDTC führt zu einem Stillstand des Zellzyklus in der S-Phase und verringert die Lebensfähigkeit von NCI-H196-Zellen in einer dosisabhängigen Weise erheblich. Diese Zytotoxizität wird auf die Induktion von oxidativem Stress zurückgeführt, was durch eine erhöhte Anzahl reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) und Veränderungen in der Expression von mit oxidativem Stress verbundenen Genen belegt wird. Der Zusatz von Antioxidantien wie N-Acetyl-L-Cystein (NAC) kann die PDTC-induzierte Zytotoxizität wirksam umkehren, was die Rolle des oxidativen Stresses beim Zelltod bestätigt.

Weitere Studien haben gezeigt, dass PDTC die Zytotoxizität von Cisplatin, einem Chemotherapeutikum der ersten Wahl zur Behandlung von SCLC, verstärkt. Die Kombination niedriger Cisplatin-Dosen mit nicht-toxischen PDTC-Konzentrationen führt zu einer synergistischen Zytotoxizität bei NCI-H196-Zellen. Es wird angenommen, dass diese Kombinationstherapie wirksam ist, weil PDTC ATP7A, einen Kupfer-Efflux-Transporter, der mit Cisplatin-Resistenz in Verbindung gebracht wird, herunterreguliert. Durch die Hemmung von ATP7A kann PDTC das intrazelluläre Kupfer erhöhen und die NCI-H196-Zellen für Cisplatin sensibilisieren, was sein Potenzial als ergänzende Therapie für SCLC unterstreicht.

Gewebe
Lunge
Krankheit
Kleinzelliges Bronchialkarzinom
Metastasenherd
Pleuraerguss
Anwendungen
3D-Zellkultur, Krebsforschung
Synonyme
  • NCI-H196
  • H-196
  • NCIH196

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Bezeichner

Quellenangabe
NCI-H196 (Cytion Katalognummer 300390)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_1509

04Handhabung und Kultur

Nährmedium
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion-Artikelnummer 820700a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

05Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

06Spender

Alter des Spenders
68 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Europäisch