NCI-H3122

Die Zelllinie NCI-H3122 stammt von nicht-kleinzelligem Lungenkrebs (NSCLC) und zeichnet sich durch das Vorhandensein des EML4-ALK-Fusionsgens aus, das aus einer chromosomalen Translokation zwischen Echinoderm microtubule-associated protein-like 4 (EML4) und anaplastischer Lymphomkinase (ALK) resultiert. Diese Fusion treibt die onkogene Signalübertragung an und macht NCI-H3122-Zellen in hohem Maße von der ALK-Signalübertragung abhängig, was als "ALK-süchtig" bezeichnet wird NCI-H3122 ist zu einem Schlüsselmodell für die Untersuchung zielgerichteter Therapien geworden, insbesondere für ALK-Inhibitoren wie Crizotinib.

Studien haben gezeigt, dass NCI-H3122-Zellen empfindlich auf Crizotinib reagieren. Crizotinib hemmt die ALK-Phosphorylierung und ihre nachgeschalteten Ziele wie den AKT- und ERK-Signalweg. Allerdings entwickelt sich häufig eine Resistenz gegen Crizotinib, die in der Regel auf alternative Signalwege wie die Aktivierung des epidermalen Wachstumsfaktorrezeptors (EGFR) zurückzuführen ist. Dieser Resistenzmechanismus wurde bei resistenten Varianten von NCI-H3122 bestätigt, bei denen eine erhöhte EGFR-Phosphorylierung beobachtet wurde, und es hat sich gezeigt, dass eine duale Hemmung von ALK und EGFR durch Crizotinib und EGFR-Inhibitoren wie Afatinib oder Erlotinib die Resistenz überwinden kann.

NCI-H3122 wird häufig zur Erforschung von Kombinationstherapien eingesetzt, die darauf abzielen, Arzneimittelresistenzen zu verhindern oder umzukehren. So hat sich beispielsweise die gezielte Beeinflussung der ALK- und EGFR-Signalwege in präklinischen Modellen als erfolgreiche Strategie erwiesen, und diese duale Hemmung wurde als potenzieller Therapieansatz für ALK-positive, Crizotinib-resistente NSCLC-Patienten vorgeschlagen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung