NCI-H1299

NCI-H1299, auch bekannt als H1299, ist eine menschliche Zelllinie für nicht-kleinzelligen Lungenkrebs (NSCLC), die aus einer Lymphknotenmetastase eines erwachsenen männlichen Patienten mit Lungenkarzinom gewonnen wurde. Zusammen mit H292-Zellen wird H1299 in der Krebsbiologie und der immunonkologischen Forschung häufig als NSCLC-Modell verwendet. Die Zelllinie weist eine epithelähnliche Morphologie auf, die durch adhärente, abgeflachte Zellen mit einer Dicke von weniger als 5 µm und einer Verdopplungszeit von etwa 22–30 Stunden gekennzeichnet ist. H1299-Zellen exprimieren Keratin und Vimentin, sind jedoch negativ für Neurofilament-Triplet-Protein, was einen Phänotyp mit sowohl epithelialen als auch mesenchymalen Merkmalen widerspiegelt.

Genetisch weisen H1299-Zellen eine homozygote partielle Deletion im TP53-Gen auf, was zu einem vollständigen Verlust der p53-Proteinexpression führt. Die Linie zeichnet sich zudem durch einen Wildtyp-KRAS-Status aus, was sie von anderen NSCLC-Modellen wie den A549-Zellen unterscheidet, die endogene KRAS-Mutationen tragen. Aufgrund des Fehlens funktioneller p53-Signalwege in Kombination mit intaktem KRAS werden H1299-Zellen häufig zur Untersuchung der Tumorsuppressorbiologie, onkogener Signalwege, Apoptose, Metastasierung und therapeutischer Resistenzmechanismen verwendet. Im Vergleich zu eher epithelialen NSCLC-Zelllinien wie A549 weisen H1299-Zellen einen eher mesenchymalen Phänotyp mit reduzierter Expression epithelialer Marker auf, was sie besonders nützlich für Untersuchungen zur epithelial-mesenchymalen Transition (EMT), Invasion und metastatischen Progression macht.

Es wurde auch berichtet, dass H1299-Zellen das Neuropeptid Neuromedin B (NMB) in geringen Mengen synthetisieren, während eine nachweisbare Produktion des Gastrin-freisetzenden Peptids (GRP) fehlt. Ihre robusten Wachstumseigenschaften, ihre hohe Transfektierbarkeit und ihr gut charakterisierter molekularer Hintergrund haben zu ihrer breiten Verwendung in Studien zu zielgerichteten Therapien, Genbearbeitung, immunvermittelter Zytotoxizität und nachgeschalteten KRAS-assoziierten Signalwegen beigetragen. Wie bei allen langfristig kultivierten Tumorzellmodellen werden eine regelmäßige Authentifizierung und die Bestätigung der wichtigsten molekularen Merkmale empfohlen, um die Reproduzierbarkeit der Experimente sicherzustellen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung