NCI-H1299

NCI-H1299, הידוע גם כ-H1299, הוא קו תאים של סרטן ריאה לא-תאי קטן (NSCLC) בבני אדם, שהוקם מתוך גרורה בבלוטת לימפה שנלקחה מחולה בוגר הסובל מסרטן ריאה. יחד עם תאי H292, H1299 נמצא בשימוש נרחב כמודל ל-NSCLC במחקר בתחום ביולוגיה של הסרטן ואימונו-אונקולוגיה. קו התאים מציג מורפולוגיה דמוית אפיתל המאופיינת בתאים דבקים ושטוחים בעובי של פחות מ-5 מיקרומטר וזמן הכפלה משוער של 22–30 שעות. תאי H1299 מבטאים קרטין ווימנטין אך הם שליליים לחלבון הנוירופילמנט המשולש, מה שמשקף פנוטיפ בעל מאפיינים אפיתליים ומזנכימליים כאחד.

מבחינה גנטית, תאי H1299 נושאים מחיקה חלקית הומוזיגוטית בגן TP53, מה שמביא לאובדן מוחלט של ביטוי חלבון p53. הקו מאופיין גם במצב KRAS מסוג wild-type, מה שמבדיל אותו מדגמים אחרים של NSCLC כגון תאי A549, הנושאים מוטציות KRAS אנדוגניות. בשל היעדר איתות p53 תפקודי בשילוב עם KRAS שלם, תאי H1299 משמשים לעתים קרובות לחקר הביולוגיה של מדכאי הגידול, מסלולי איתות אונקוגניים, אפופטוזיס, גרורות ומנגנוני עמידות טיפולית. בהשוואה לקווי תאים של NSCLC בעלי אופי אפיתליאלי יותר, כגון A549, תאי H1299 מציגים פנוטיפ מזנכימלי יותר עם ביטוי מופחת של סמנים אפיתליאליים, מה שהופך אותם לשימושיים במיוחד לחקירת מעבר אפיתליאלי-למזנכימלי (EMT), פלישה והתקדמות גרורתית.

כמו כן, דווח כי תאי H1299 מסנתזים את הנוירופפטיד נוירומדין B (NMB) ברמות נמוכות, בעוד שהם אינם מייצרים פפטיד משחרר גסטרין (GRP) ברמות ניתנות לזיהוי. מאפייני הצמיחה החזקים שלהם, יכולת הטרנספקציה הגבוהה והרקע המולקולרי המאופיין היטב תרמו לשימוש הנרחב בהם במחקרים העוסקים בטיפולים ממוקדים, עריכת גנים, ציטוטוקסיות מתווכת חיסון ומסלולי איתות הקשורים ל-KRAS במורד הזרם. כמו בכל מודלי תאי הגידול המגודלים לטווח ארוך, מומלץ לבצע אימות תקופתי ואישור של מאפיינים מולקולריים מרכזיים כדי להבטיח את השחזור הניסויי.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו