NCI-H1299

NCI-H1299, також відома як H1299, — це клітинна лінія недрібноклітинного раку легенів (НДКРЛ) людини, отримана з метастазу в лімфатичному вузлі у дорослого пацієнта чоловічої статі з карциномою легенів. Разом із клітинами H292 лінія H1299 широко використовується як модель НДКРЛ у дослідженнях з біології раку та імуноонкології. Клітинна лінія має епітеліоподібну морфологію, що характеризується адгезивними, сплощеними клітинами товщиною менше 5 мкм і приблизним часом подвоєння 22–30 годин. Клітини H1299 експресують кератин і віментин, але є негативними щодо триплетного білка нейрофіламенту, що відображає фенотип з епітеліальними та мезенхімальними характеристиками.

Генетично клітини H1299 мають гомозиготну часткову делецію в гені TP53, що призводить до повної втрати експресії білка p53. Ця лінія також характеризується диким типом KRAS, що відрізняє її від інших моделей НДРЛ, таких як клітини A549, які несуть ендогенні мутації KRAS. Завдяки відсутності функціонального сигнального шляху p53 у поєднанні з інтактним KRAS клітини H1299 часто використовують для вивчення біології супресорів пухлин, онкогенних сигнальних шляхів, апоптозу, метастазування та механізмів резистентності до терапії. У порівнянні з більш епітеліальними клітинними лініями НДРЛ, такими як A549, клітини H1299 демонструють більш мезенхімальний фенотип зі зниженою експресією епітеліальних маркерів, що робить їх особливо корисними для досліджень епітеліально-мезенхімального переходу (ЕМТ), інвазії та прогресування метастазування.

Також повідомлялося, що клітини H1299 синтезують нейропептид нейромедин B (NMB) у невеликих кількостях, тоді як вироблення пептиду, що вивільняє гастрин (GRP), не виявляється. Їхні потужні характеристики росту, висока трансфектованість та добре охарактеризований молекулярний фон сприяли їх широкому використанню в дослідженнях, що стосуються цільових терапій, редагування генів, імуноопосередкованої цитотоксичності та низових сигнальних шляхів, пов’язаних із KRAS. Як і для всіх моделей пухлинних клітин, що культивуються протягом тривалого часу, рекомендується періодична аутентифікація та підтвердження ключових молекулярних характеристик для забезпечення відтворюваності експериментів.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>