NCI-H1299

A NCI-H1299, também conhecida como H1299, é uma linha celular de cancro do pulmão de células não pequenas (NSCLC) humana, estabelecida a partir de uma metástase num gânglio linfático proveniente de um doente adulto do sexo masculino com carcinoma pulmonar. Juntamente com as células H292, a H1299 é amplamente utilizada como modelo de NSCLC na investigação em biologia do cancro e imuno-oncologia. A linha celular apresenta uma morfologia de tipo epitelial, caracterizada por células aderentes e achatadas com uma espessura inferior a 5 µm e um tempo de duplicação aproximado de 22–30 horas. As células H1299 expressam queratina e vimentina, mas são negativas para a proteína triplete de neurofilamentos, refletindo um fenótipo com características tanto epiteliais como mesenquimais.

Geneticamente, as células H1299 apresentam uma deleção parcial homozigótica no gene TP53, resultando na perda completa da expressão da proteína p53. A linha é também caracterizada pelo estado KRAS de tipo selvagem, distinguindo-a de outros modelos de NSCLC, tais como as células A549, que apresentam mutações KRAS endógenas. Devido à ausência de sinalização funcional de p53, combinada com KRAS intacto, as células H1299 são frequentemente utilizadas para estudar a biologia dos supressores tumorais, vias de sinalização oncogénicas, apoptose, metástase e mecanismos de resistência terapêutica. Em comparação com linhas celulares de NSCLC mais epiteliais, como as A549, as células H1299 apresentam um fenótipo mais mesenquimal com expressão reduzida de marcadores epiteliais, tornando-as particularmente úteis para investigações sobre a transição epitelial-mesenquimal (EMT), invasão e progressão metastática.

Também foi relatado que as células H1299 sintetizam o neuropeptídeo neuromedina B (NMB) em níveis baixos, enquanto não apresentam produção detetável do peptídeo libertador de gastrina (GRP). As suas características de crescimento robusto, elevada transfectabilidade e contexto molecular bem caracterizado contribuíram para a sua ampla utilização em estudos envolvendo terapias direcionadas, edição genética, citotoxicidade imunomediada e vias de sinalização a jusante associadas ao KRAS. Tal como acontece com todos os modelos de células tumorais cultivadas a longo prazo, recomenda-se a autenticação e confirmação periódicas das principais características moleculares para garantir a reprodutibilidade experimental.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia