NCI-H1299

NCI-H1299، المعروف أيضًا باسم H1299، هو خط خلوي لسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة (NSCLC) لدى الإنسان، تم إنشاؤه من ورم خبيث في العقدة الليمفاوية مستمد من مريض ذكر بالغ مصاب بسرطان الرئة. إلى جانب خلايا H292، تُستخدم خلايا H1299 على نطاق واسع كنموذج لسرطان الرئة ذي الخلايا غير الصغيرة في أبحاث بيولوجيا السرطان وعلم الأورام المناعي. يُظهر خط الخلايا مورفولوجيا شبيهة بالخلايا الظهارية تتميز بخلايا ملتصقة ومسطحة بسمك أقل من 5 ميكرومتر ووقت مضاعفة يبلغ تقريبًا 22-30 ساعة. تعبر خلايا H1299 عن الكيراتين والفيمنتين ولكنها سلبية بالنسبة لبروتين ثلاثي الخيوط العصبية، مما يعكس نمطًا ظاهريًا له خصائص ظهارية ووسطية على حد سواء.

من الناحية الجينية، تحتوي خلايا H1299 على حذف جزئي متماثل في جين TP53، مما يؤدي إلى فقدان كامل لتعبير بروتين p53. يتميز هذا الخط أيضًا بحالة KRAS من النوع البري، مما يميزه عن نماذج NSCLC الأخرى مثل خلايا A549، التي تحمل طفرات KRAS داخلية. نظرًا لغياب إشارات p53 الوظيفية جنبًا إلى جنب مع KRAS السليم، تُستخدم خلايا H1299 بشكل متكرر لدراسة بيولوجيا مثبطات الأورام ومسارات الإشارات المسببة للأورام وموت الخلايا المبرمج والانبثاث وآليات مقاومة العلاج. بالمقارنة مع سلالات خلايا سرطان الرئة غير صغير الخلايا (NSCLC) الأكثر ظهارية مثل A549، تُظهر خلايا H1299 نمطًا ظاهريًا أكثر لاصقًا مع انخفاض في تعبير علامات الظهارة، مما يجعلها مفيدة بشكل خاص في الأبحاث المتعلقة بالانتقال الظهاري-اللاصقي (EMT)، والغزو، وتطور النقائل.

كما تم الإبلاغ عن أن خلايا H1299 تقوم بتخليق الببتيد العصبي نيوروميدين B (NMB) بمستويات منخفضة، في حين تفتقر إلى إنتاج الببتيد المطلق للغاسترين (GRP) القابل للكشف. وقد ساهمت خصائص نموها القوية، وقابليتها العالية للتحويل الجيني، وخلفيتها الجزيئية الموصوفة جيدًا في استخدامها على نطاق واسع في الدراسات التي تتضمن العلاجات الموجهة، وتحرير الجينات، والسمية الخلوية المناعية، ومسارات الإشارات المرتبطة بـ KRAS. وكما هو الحال مع جميع نماذج الخلايا السرطانية المزروعة على المدى الطويل، يوصى بإجراء المصادقة والتأكيد الدوري للسمات الجزيئية الرئيسية لضمان قابلية تكرار التجارب.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان