.jpg)
- الأنسجة
- الرئة
- المرض
- سرطان الخلايا الكبيرة في الرئة
- موقع الانتشار
- الانصباب الجنبي
- المرادفات
- NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460
المستندات
NCI-H460
Cell line · رقم المنتج 305020
NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...
التخصيص / التوصيات
- NCI-H460Cell line€430.00
موصى بها (أحدث دفعة)
01معلومات عامة
- الوصف
- تم اشتقاق NCI-H460، والمعروف أيضًا باسم H460، من مريض ذكر مصاب بسرطان الرئة كبير الخلايا. خلايا NCI-H460 هي خلايا ملتصقة تنمو أسرع بمرتين من خلايا A549 مع زمن مضاعفة يبلغ 33 ساعة في RPMI 1640 المضاف إليه 10% من الحمض الأميني. ويمكنها تكوين أورام في كل من النماذج المختبرية والحية على حد سواء، بما في ذلك الفئران العارية. وقد تبين أن خلايا NCI-H460 تعبر عن الحمض النووي الريبي المرسال p53 بمستويات عالية مماثلة لأنسجة الرئة الطبيعية، بينما لا تظهر أي تشوهات هيكلية جسيمة في الحمض النووي. وتصبغ هذه الخلايا بشكل إيجابي للكيراتين والفيمنتين ولكنها سلبية بالنسبة للبروتين الثلاثي العصبي. وقد أظهر تحليل الإنزيمات أن بروتين HPRT متمركز على سطح خطوط خلايا سرطان الرئة غير صغيرة الخلايا هذه. يتم التعبير عن إنزيمات AK-1 و ES-D و Me-2 عند المستوى 1، بينما يتم التعبير عن إنزيمات G6PD و PGM1 و PGM3 عند المستوى B و 1-2 على التوالي. تحتوي الخلايا على نمط نووي ناقص الصيغة الصبغية مع عدد كروموسومات نموذجي يبلغ 57 كروموسومًا، ويتراوح بين 53 و65 كروموسومًا. وتشترك سبعة كروموسومات مؤشِّرة في جميع الخلايا، بما في ذلك دير(9) t(1;9)(q21;p24)، ودير(9) t(7;9)(p11;p22)، و t(10q14q)، ودير(16) t(7;16)(q11.23;q22). إن مستويات التعبير العالية للحمض النووي الريبوزي المرسال p53 تجعلها نموذجاً مناسباً لدراسة الآليات الجزيئية لسرطان الرئة غير صغير الخلايا.
- الأنسجة
- الرئة
- المرض
- سرطان الخلايا الكبيرة في الرئة
- موقع الانتشار
- الانصباب الجنبي
- المرادفات
- NCI-H460
- NCI.H460
- H-460
- NCIH460
- NCI-HUT-460
- NCI-460
02التصنيف
- كائن حي
- إنسان
- الجنس
- ذكر
- خصائص النمو
- الملتزم
- مستوى السلامة البيولوجية
- 1
03الخصائص
- المورفولوجيا
- الظهارة
- مُسبِّب للأورام
- نعم
04المعرّفات
- المرجع
- H-460 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 305020)
- رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
- 9606
- سيلوصور
- CVCL_0459
05التعامل مع النباتات وزراعتها
- وسط الاستزراع
- RPMI 1640، ث: 2.0 مللي مولار جلوتامين مستقر، ث: 2.0 جم/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820700a من سايتيون)
- بيئة الحضانة
37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.
- المكملات الغذائية
- قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
- كاشف التفكك
- أكوتاس
- إعادة الاستنبات
- قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
- تجديد السوائل
- 2 إلى 3 مرات في الأسبوع
- إذابة الثلج والزراعة
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد
- العقم
يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.
ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.
- وسط التجميد
- كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
- شروط التخزين
للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.
- شروط الشحن
تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.
07المانح
- الأصل العرقي
- أوروبي
08الشؤون القانونية والسلامة
- احتياطات السلامة
- عند التخطيط لتخزين القارورة المبردة في النيتروجين السائل لإذابتها في المستقبل، من الضروري الالتزام بتدابير السلامة الصارمة. من الضروري ارتداء قفازات وملابس واقية مناسبة، كما يلزم استخدام قناع الوجه أو نظارات السلامة أثناء نقل العينات المجمدة من خزان النيتروجين السائل أو إليه. وذلك للتخفيف من خطر الإصابة من الانفجارات المحتملة للنيتروجين المبرد عند الإزالة، والتي يمكن أن تؤدي إلى قذف شظايا حادة.
- الضمان
في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج
للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان
- يلزم إبرام اتفاقية نقل المواد
- نعم
.jpg)
.jpg)
