.jpg)
- Vev
- Lunge
- Sykdom
- Storcellet lungekarsinom
- Metastaseområde
- Pleuraeffusjon
- Synonymer
- NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460
Dokumenter
NCI-H460
Cell line · Produktnummer 305020
NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...
Tilpasning / Anbefalinger
- NCI-H460Cell line€430.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
- NCI-H460, også kjent som H460, stammer fra en mannlig pasient med storcellet lungekarsinom. NCI-H460-celler er adherente celler som vokser dobbelt så raskt som A549-celler, med en fordoblingstid på 33 timer i RPMI 1640 tilsatt 10 % FBS. De kan danne svulster i både in vitro- og in vivo-modeller, inkludert nakenmus. NCI-H460-celler har vist seg å uttrykke p53-mRNA på et høyt nivå som kan sammenlignes med normalt lungevev, samtidig som de ikke viser noen grove strukturelle DNA-abnormaliteter. De farges positivt for keratin og vimentin, men er negative for nevrofilamenttriplettprotein. Isoenzym-analyser har vist at HPRT er lokalisert på overflaten av disse ikke-småcellede lungekreftcellelinjene. AK-1-, ES-D- og Me-2-isoenzymene uttrykkes på nivå 1, mens G6PD- og PGM1- og PGM3-isoenzymene uttrykkes på henholdsvis nivå B og 1-2. Cellene har en hypotriploid karyotype med et modalt kromosomnummer på 57, med en variasjon fra 53 til 65. Sju markørkromosomer er felles for alle cellene, deriblant der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22). De høye uttrykksnivåene av p53-mRNA gjør dem til en egnet modell for å studere de molekylære mekanismene ved ikke-småcellet lungekreft.
- Vev
- Lunge
- Sykdom
- Storcellet lungekarsinom
- Metastaseområde
- Pleuraeffusjon
- Synonymer
- NCI-H460
- NCI.H460
- H-460
- NCIH460
- NCI-HUT-460
- NCI-460
02Klassifisering
- Organisme
- Menneske
- Sex
- Mann
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Epitelial
- Tumorinduserende
- Ja
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- H-460 (Cytion-katalognummer 305020)
- NCBI-skattenummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0459
05Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- RPMI 1640, m: 2,0 mM stabil glutamin, m: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion artikkelnummer 820700a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
07Donor
- Etnisitet
- Europeisk
08Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja
.jpg)
.jpg)
