Skip to content
NCI-H460
Tissue
Phổi
Disease
Ung thư phổi tế bào lớn
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
NCI-H460, NCI.H460, H-460, NCIH460, NCI-HUT-460, NCI-460

Documents

NCI-H460

Cell line · Product number 305020

NCI-H460, also known as H460, was derived from a male patient with large cell lung carcinoma. NCI-H460 cells are adherent cells growing twice as fast than th...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description
NCI-H460, còn được gọi là H460, được phân lập từ một bệnh nhân nam mắc ung thư phổi tế bào lớn. Tế bào NCI-H460 là tế bào bám dính, phát triển nhanh gấp đôi so với tế bào A549, với thời gian nhân đôi là 33 giờ trong môi trường RPMI 1640 bổ sung 10% huyết thanh bò (FBS). Chúng có thể hình thành khối u trong cả mô hình in vitro và in vivo, bao gồm chuột nude. Tế bào NCI-H460 đã được chứng minh là biểu hiện mRNA p53 ở mức cao tương đương với mô phổi bình thường, đồng thời không có bất thường cấu trúc DNA rõ rệt. Chúng cho kết quả dương tính với keratin và vimentin nhưng âm tính với protein neurofilament triplet. Phân tích isoenzyme cho thấy HPRT được định vị trên bề mặt của các dòng tế bào ung thư phổi không phải tế bào nhỏ này. Các isoenzyme AK-1, ES-D và Me-2 được biểu hiện ở mức 1, trong khi các isoenzyme G6PD, PGM1 và PGM3 được biểu hiện ở mức B và 1-2, tương ứng. Các tế bào có karyotype hypotriploid với số lượng nhiễm sắc thể trung bình là 57, dao động từ 53 đến 65. Bảy nhiễm sắc thể dấu hiệu chung cho tất cả các tế bào, bao gồm der(9)t(1;9)(q21;p24), der(9)t(7;9)(p11;p22), t(10q14q), der(16)t(7;16)(q11.23;q22). Mức độ biểu hiện cao của mRNA p53 khiến chúng trở thành mô hình phù hợp để nghiên cứu các cơ chế phân tử của ung thư phổi không phải tế bào nhỏ.
Tissue
Phổi
Disease
Ung thư phổi tế bào lớn
Metastatic site
Tràn dịch màng phổi
Synonyms
  • NCI-H460
  • NCI.H460
  • H-460
  • NCIH460
  • NCI-HUT-460
  • NCI-460

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
Thượng bì
Tumourigenic
Có

04Identifiers

Citation
H-460 (Số catalog Cytion 305020)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0459

05Handling and culture

Culture medium
RPMI 1640, chứa: 2,0 mM glutamine ổn định, chứa: 2,0 g/L NaHCO₃ (Số hiệu sản phẩm Cytion 820700a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO₂, môi trường ẩm.

Supplements
Bổ sung 10% huyết thanh bò phôi (FBS) vào môi trường nuôi cấy
Dissociation reagent
Accutase
Subculturing
Loại bỏ môi trường nuôi cấy cũ khỏi các tế bào bám dính và rửa chúng bằng PBS không chứa canxi và magiê. Đối với bình T25, sử dụng 3-5 ml PBS, và đối với bình T75, sử dụng 5-10 ml. Sau đó, phủ hoàn toàn các tế bào bằng Accutase, sử dụng 1-2 ml cho bình T25 và 2,5 ml cho bình T75. Để tế bào ủ ở nhiệt độ phòng trong 8-10 phút để tách chúng ra. Sau khi ủ, nhẹ nhàng trộn tế bào với 10 ml môi trường để tái phân tán chúng, sau đó ly tâm ở 300xg trong 3 phút. Loại bỏ dịch trên, tái phân tán tế bào trong môi trường tươi và chuyển chúng vào các bình mới đã chứa môi trường tươi.
Fluid renewal
2 đến 3 lần mỗi tuần
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Freeze medium
Như một môi trường bảo quản đông lạnh, chúng tôi sử dụng môi trường tăng trưởng hoàn chỉnh (bao gồm FBS) + 10% DMSO để đảm bảo độ sống sau khi rã đông, hoặc CM-1 (mã sản phẩm Cytion 800100), bao gồm các chất bảo vệ thẩm thấu và chất ổn định chuyển hóa được tối ưu hóa để cải thiện quá trình phục hồi và giảm stress do đông lạnh gây ra.
Storage conditions

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Shipping conditions

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

07Donor

Ethnicity
Châu Âu